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キャピラリー電気泳動によるドキソルビシン誘導DNA断片化の定量的評価

通过毛细管电泳定量评估阿霉素诱导的 DNA 断裂

基本信息

批准号：
08F08035
负责人：
今坂藤太郎
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2009
项目状态：
已结题

项目摘要

昨年度は、20mMのタウロデオキシコール酸と2%の2-ヒドロキシプロピル-γ-シクロデキストリンを含むホウ酸緩衝溶液(60mM、pH9.3)を泳動溶液として用いることで、2種のアントラサイクリン系抗がん剤を20分以内で分離できることを明らかにした。平成21年度には、この方法を4種の抗がん剤に適用した。同様の泳動溶液を用いて、アントラサイクリン系の抗がん剤であるドキソルビシン、エピルビシン、イダルビシン、ドウノルビシンの分離を達成することができた。昨年度の研究結果から、アントラサイクリン系の抗がん剤は、4時間程度まで細胞内に蓄積されるが、その後、膜タンパク質であるp-糖タンパク質(MDR)と多剤耐性関連タンパク質(MRP)により細胞外に放出されることがわかった。そこで、p-糖タンパク質の阻害剤であるサイクロスポリンA、ベラパミル、プロビニシッドで細胞を処理し、細胞内に抗がん剤を蓄積できるかどうかを検討した。その結果、ベラパミルを単独で用いた場合に、細胞内への抗がん剤の蓄積が顕著であることを発見した。また、その蓄積挙動は抗がん剤の種類によっても異なっていた。ベラパミルはMDRを阻害し、プロビニシッドはMRPを阻害することが知られている。したがって、本研究で得られた結果は、研究で用いた細胞(RDES)では、MRPよりもMDRがより多く発現していることを示唆するものである。したがって、開発した分離分析法は、細胞内に取り込まれた複数の抗がん剤を同時に計測できるとともに、多剤耐性に関連するタンパク質の阻害剤の効能評価にも応用できることが明らかとなった。

Last year, 20mM of 2-hydroxy-2-hydroxy-2-hydroxy-3-hydroxy-3-hydroxy-2-hydroxy-3-hydroxy-2-hydroxy-3-hydroxy-4-hydroxy-3-hydroxy-3-hydroxy-4-hydroxy-3-hydroxy-4-hydroxy-4-hydroxy-3-hydroxy-4-hydroxy-3-hydroxy-4-hydroxy-4-hydroxy-3 - 4-hydroxy-4-hydroxy-3 - 4-hydroxy Heisei 21 years, the method of four kinds of resistance to the application of. The same kind of swimming solution is used in the middle of the solution, and the separation of the anti-solvent system is achieved. Last year's results showed that the resistance of the drug system was increased by 4 times, and the intracellular accumulation was increased by 4 times, and the membrane resistance was increased by 4 times. P-glycans are used to inhibit cell processing and intracellular accumulation of P-glycans As a result, the accumulation of anti-inflammatory agents in cells has been observed in isolated cases. In addition, the accumulation of various kinds of drugs may be different. In addition to the above, it is necessary to prevent MDR from happening. The results obtained in this study are as follows: 1. Research on MDR cells (RDES); 2. MRP; 3. MDR; and 4. The method of separation and analysis for the determination of multiple resistance agents in cells