寄生性ヤツメウナギは2つの独立したレニン・アンジオテンシン系をもつ

寄生七鳃鳗有两个独立的肾素-血管紧张素系统

基本信息

批准号：
08F08415
负责人：
竹井祥郎
金额：
$ 1.22万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2010
项目状态：
已结题

项目摘要

私どもは、ヤツメウナギの血液中から真骨魚と同じアミノ酸配列をもつアンジオテンシンを単離・精製したが、ヤツメウナギのゲノム中に異なる配列をもつアンジオテンシンの遺伝子を発見した。そこで、ヤツメウナギは宿主である真骨類の血液中からアンジオテンシンノゲンとそこからアンジオテンシンを切り取る酵素であるレニンを吸収して血液中でアンジオテンシンを生成するという仮説を立て、次の実験を行った。1)我国では寄生をしているヤツメウナギを手に入れることが難しいので、五大湖の寄生性ウミヤツメ(Petromyzon marinus)を利用するため、New Hampshre大学のStacia Sower博士の研究室に行き実験を行った。すなわち、異なるアンジオテンシン配列をもつ2種の真骨類(ヒラメとニジマス)に寄生させ、異なるアンジオテンシンがヤツメウナギの血液中で生成されるかを調べた。しかし、実験室ではストレスのため吸血させることが難しく、また動物愛護法のため強制的に血液を消化管に注入することが許されなかったため、実験は成功しなかった。2)ヤツメウナギのアンジオテンシンを合成してその抗体を作成し、ヤツメウナギの血漿中にそれが存在することを高速液体クロマトグラフィーとラジオイムノアッセイを組み合わせて確認した。3)ヤツメウナギの血管にカニューレを挿入して、真骨類とヤツメウナギのアンジオテンシンの血圧作用を比較した。その結果、真骨類アンジオテンシンの昇圧作用は極めて弱く、血圧調節に生理的に関与しているというよりも、寄生動物がもつ免疫寛容作用のために利用していると予想された。いっぽう、ヤツメウナギのアンジオテンシンは、強力に血圧を下げる作用を持つことがわかった。

我们分离了与lampre的血液中的氨基酸序列相同的氨基酸序列，并从七lamp虫的血液中分离出具有相同的氨基酸序列，并发现了在七语基因组中具有不同序列的血管紧张素基因。因此，我们假设lamp虫从宿主真骨和肾素的血液中吸收血管紧张素，这是一种裂解血管紧张素的酶，并在血液中产生血管紧张素，并进行以下实验。 1）很难在日本获得寄生lamp虫，因此我要使用大湖区的寄生lamp虫（Petromyzon Marinus），我去了New Hampshre University的Stacia Sower博士实验室进行实验。换句话说，它在具有不同的血管紧张素序列的两个真正的骨骼（比目鱼和彩虹鳟鱼）上被寄生，并检查了在lample鼠的血液中是否产生了不同的血管紧张素。但是，该实验没有成功，因为压力导致其导致血液吸收实验室的血液，并且由于动物福利法，不允许将血液迫使血液进入消化道。 2）合成了来自Lamprey的血管紧张素以制备抗体，并通过结合高性能液相色谱和放射免疫测定来确认其在Lamprey血浆中的存在。 3）将插管插入七lamp虫的血管中，以比较真实骨骼和七lamp虫中血压的血压影响。结果，真正的骨毒素的压力促进作用极为弱，并且可以预测它被用于寄生虫的免疫耐受效应，而不是生理参与血压调节。另一方面，已发现来自七lamp的血管紧张素对降低血压具有强大的作用。