心房性ナトリウム利尿ペプチドの作用機構:塩類細胞をモデルとして

心房钠尿肽的作用机制：以盐水细胞为模型

基本信息

批准号：
08640843
负责人：
竹井祥郎
金额：
$ 1.34万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08640843/
关键词：
ANP CNP ANP受容体塩類細胞ウナギ浸透圧調節カルシウム鰓

项目摘要

ウナギを海水に移すと、血液量が減少するにもかかわらず、血漿ナトリウム濃度の上昇に伴って、血漿中の心房性ナトリウム利尿ペプチド(ANP)濃度が上昇する。一方、ANPは海水に適応したウナギに作用して、ナトリウムの摂取を抑制し、排泄を促進することにより海水に適応させる。すなわち、ANPは海水ウナギの飲水を抑制し、腸からのナトリウムの吸収を抑制する。また、ANPはナトリウムを捨てるホルモンであるコルチゾルの分泌を促進し、自分自身も鰓や腎臓に作用してナトリウムの排泄を促進する。このように、ANPは海水に適応させるホルモンであると考えられているが、同じファミリーに属するC型ナトリウム利尿ペプチド(CNP)は、淡水適応に重要なホルモンである可能性が高い。ANPファミリーのうち、CNPのみがウナギを海水に移すと血漿レベルが減少する。また、CNPに特異的な受容体であるB型受容体(NPR-B)の発現は、調べられた全ての組織で海水に移すと減少する。さらに、NPR-Bに対する抗体を作成し、鰓を免疫組織化学法で調べたところ、受容体は鰓の塩類細胞に局在していた。淡水における塩類細胞の機能は、環境水からナトリウムやカルシウムを吸収することにあるといわれているが、私たちは、「CNPは、淡水に適応したウナギの塩類細胞に作用して、カルシウムの吸収を促進する」という仮説をたてた。それを証明するため、まず鰓からはぎ取った細胞群から、Ficolを用いた分別遠心法により、塩類細胞のみを集める技術を確立した。そして、FITCでラベルしたCNPを用いて、蛍光顕微鏡下で、塩類細胞にCNPが結合すると細胞内のカルシウム濃度が上昇するところを、カルシウム感受性の蛍光色素を用いて観察しようと試みている。この実験により、淡水のサカナの鰓にある塩類細胞の機能が、初めて明らかにされることになる。

尽管血容量降低，但将鳗鱼转移到海水中会增加血浆中心房肽（ANP）的浓度。另一方面，ANP对适应海水的鳗鱼作用，抑制钠摄入量并促进排泄物，从而适应海水。换句话说，ANP抑制了海水鳗鱼的饮用，并抑制了肠中钠的吸收。 ANP还促进了皮质醇的分泌，皮质醇是一种丢弃钠的激素，并作用于g和肾脏本身以促进钠的排泄。因此，ANP被认为是适合海水的激素，但是属于同一家族的C型纳地酸肽（CNP）可能是淡水适应的重要激素。在ANP家族中，只有CNPS将鳗鱼转移到海水中，降低了血浆水平。此外，当在所有检查的组织中转移到海水时，CNP特异性受体（NPR-B）的表达降低。此外，制备针对NPR-B的抗体，并通过免疫组织化学方法检查ills，并将受体定位于ill的盐细胞。据说淡水中盐细胞的功能是从环境水中吸收钠和钙，但我们假设“ CNP作用于适合淡水并促进钙吸收的鳗鱼的盐细胞上。”为了证明这一点，我们建立了一种技术，仅通过使用FICOL单独离心从g中剥离的细胞收集盐细胞。当CNP使用FITC标记的CNP结合在荧光显微镜下，使用钙敏感的荧光染料，我们试图观察细胞内钙浓度的升高。该实验将首次揭示盐细胞在淡水gil中的功能。