無心臓ウナギを用いた心房性ナトリウム利尿ホルモンの生理作用及び分泌機構の解析

无情鳗鱼心钠素生理效应及分泌机制分析

• 批准号: 01540620
• 负责人: 竹井 祥郎
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Kitasato University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01540620/
• 关键词: 心房性ナトリウム利尿ペプチド; 脳ナトリウム利尿ペプチド; 系統発生学; 魚類; 分子進化; 降圧作用; ラジオイムノアッセイ

1.ヒト心房性ナトリウム利尿ペプチド(ANP)の抗体を用いてウナギ心臓を免疫組織化学的に調べたところ、交叉性を示す心筋細胞が多数みられた。免疫電顕で調べたところ、この免疫交叉物質は分泌顆粒中に含まれていた。ヒトANPのラジオイムノアッセイ(RIA)を用いてウナギ血漿中ANP量を測定したところ、ヒトより大量の免疫活性物質があった。ゲルロ過により、ウナギ血漿中には大量の高分子型(14KD)と少量の低分子型(約4KD)のANPが存在することがわかった。また、RIAと生物検定との測定値の違いから、ヒトANP抗体はウナギANPと交叉性が極めて低いことがわかった。従って、ウナギANPに固有のRIA系を確立する必要に迫られた。2.その第一歩として、1700個のウナギ心房よりANPを単離し、構造を決定した。ウナギANPは27個のアミノ酸より成り、ヒトやラットANPと59%、ニワトリANPと52%、カエルANPと46%の相同性を示した。ヒトANP抗体との交叉性は0.4%であった。3.ウナギANPの降圧活性は、ウナギでヒトANPの100倍、ラットでは1/10であった。4.ウナギANPの抗体を作成し、RIA系を確立した。この系で測定すると、ウナギ心房のANP含量はヒトの系での測定値の600倍であったが、脳の含量は30倍であった。従って、脳には脳ナトリウムペプチド(BNP)が存在する可能性が示唆された。5.そこで、ウナギ脳2000個よりBNPを単離し、その構造を決定した。ウナギBNPは22個のアミノ酸より成り、ヒトBNPと65%、ブタBNPと70%、ラットBNPと57%の相同性を示した。6.現在、合成ウナギANP、およびそれに固有のRIAを用いて、ANPの生理作用や分泌機構を調べている。

1. ヒ ト atrial sex ナ ト リ ウ ム diuresis ペ プ チ ド (ANP) を の antibody with い て ウ ナ ギ heart perforatien を immunohistochemical に adjustable べ た と こ ろ its を す heart muscle cells が most み ら れ た. The immune electrical 顕で modulator べたと ろ ろ ろ and <s:1> immune cross-substance た secreted particles に contain まれて た た た. ヒ ト ANP の ラ ジ オ イ ム ノ ア ッ セ イ (RIA) を い て ウ ナ ギ determination of ANP in plasma volume を し た と こ ろ, ヒ ト よ り large の immune active substances が あ っ た. Ever ゲ ル ロ に よ り, ウ ナ ギ に in plasma は large の polymeric (14 kd) と small の low molecular type kd (about 4) の ANP が exist す る こ と が わ か っ た. ま た, RIA と biological 検 と の on determination of numerical の violations い か ら, ヒ ト ANP antibody は ウ ナ ギ ANP と crossed が め extremely low て い こ と が わ か っ た. Youdaoplaceholder0 and ウナギANPに are inherent in the <s:1> RIA system を. It is necessary to establish する and に urgently られた. 2. Youdaoplaceholder0 そ the first step is と て て, 1700 <s:1> ウナギ atria よ <s:1> ANPを単 are separated from <s:1>, and the structure を determines the た. ウ ナ ギ ANP は 27 の ア ミ ノ acid よ り り, ヒ ト や ラ ッ ト ANP と 59%, ニ ワ ト リ ANP と 52%, カ エ ル ANP と 46% gay を の phase in し た. Youdaoplaceholder0 ANP antibody と <s:1> cross-crossing ヒト 0.4%であった. 3. Youdaoplaceholder0 ANP <s:1> depressor activity ウナギ, ウナギでヒトANP <s:1> 100 times, ラットで 1/10であった. 4. Youdaoplaceholder0 ANP <s:1> antibody を was prepared to form を, and RIA series を was established to form た た. こ の is determination of で す る と, ウ ナ ギ atrial の ANP content は ヒ ト の is で の on determination of numerical の 600 times で あ っ た が, 脳 の content 30 times は で あ っ た. Youdaoplaceholder0, 脳に 脳ナトリウムペプチド 脳ナトリウムペプチド(BNP)が there is a する possibility that が indicates された. 5. Youdaoplaceholder0 で で, ウナギ脳2000 よ BNPを単 are separated from <s:1>, そ <s:1> the structure を determines た. ウ ナ ギ BNP は 22 の ア ミ ノ acid よ り り, ヒ ト BNP と 65%, ブ タ BNP と 70%, ラ ッ ト BNP と 57% gay を の phase in し た. 6. Now, synthetic ウ ナ ギ ANP, お よ び そ れ に inherent の RIA を with い て, ANP の physiology や secretion institutions を adjustable べ て い る.

项目成果

Takei,Y.,Watanabe,T.X: "Uasodepressor actions of atrial natriuretic peptides in the quail,Coturmix cofurnix Japanica." Zool Sci. (1990)

Takei，Y.，Watanabe，T.X：“鹌鹑，Coturmix cofurnix Japanica 中心房钠尿肽的尿素抑制作用。”

Togashi K,Hirata Y.,Ando,K,Takei,Y.,Kawakami,M.,Marumo,F.: "Brain natriuretic peptide-like immunoreactivity is present in human plasma" FEBS Letters. 250. 235-237 (1989)

Togashi K、Hirata Y.、Ando,K、Takei,Y.、Kawakami,M.、Marumo,F.：“人血浆中存在脑钠尿肽样免疫反应性”FEBS 快报。

Takei,Y.,Takahashi,A.,Watanabe,T,X.,Nakajima,K.,Sakakibara,S.: "Amino acid sequence and relative biological activity of eel atrial ratriuvetic peptide" Biochem Biophys Res Commun.164. 537-543 (1989)

Takei，Y.，Takahashi，A.，Watanabe，T，X.，Nakajima，K.，Sakakibara，S.：“鳗鱼心房促尿肽的氨基酸序列和相对生物活性”Biochem Biophys Res Commun.164。

Takei,Y,.Okawara,Y,.Kobayashi,H.: "Control of drinking in birds.In“Progress in Avian Osmoregulation"Eds,by M.R.Hughos and A.C.Chadwick" Leeds Philosophical and Literary Ltd,Leeds., (1990)

Takei, Y, Okawara, Y, Kobayashi, H.：“鸟类饮水的控制。在“禽类渗透调节的进展”中，由 M.R.Hughos 和 A.C.Chadwick 编辑”利兹哲学和文学有限公司，利兹，（1990 年）

竹井祥郎: "水・電解質代謝に関与するペプチドホルモンレセプタ" 病態生理. 8. 23-30 (1989)

Yoshiro Takei：“参与水和电解质代谢的肽激素受体”病理生理学 8. 23-30 (1989)。