权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

バイオ・ナノ融合テクノロジーを基盤とした新規的な骨・軟骨誘導剤の開発

基于生物纳米融合技术的新型骨软骨诱导剂的开发

基本信息

批准号：
08J08868
负责人：
北條宏徳
金额：
$ 1.15万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2010
项目状态：
已结题

项目摘要

1.新規候補薬剤の骨・軟骨形成メカニズム解析(in vitro, in vivo解析。標的遺伝子変異マウスの作成等)Hhシグナル活性剤SAGの骨促進メカニズムの検討を行った。SAG曝露によりHhシグナルの下流因子であるGli1, Gli2およびGli3のmRNA発現およびタンパク質局在を検討した結果、SAG曝露によりGli1のmRNA発現および細胞核内におけるタンパク質発現が上昇した。Gli2はmRNA,タンパク発現共に大きな変化は認められなかった。一方、Gli3に関してはmRNA発現には大きな変化は認められなかったものの、細胞核内における抑制型Gli3の発現が消失した。以上の結果、Gli1およびGli3がHhシグナル反応性であるのに対し、Gli2はHhシグナル非反応性である可能性が示唆された。また、各Gliの発現ベクターを細胞にトランスフェクションし、一定期間培養した後、RNAを回収し、骨芽細胞分化マーカーの発現をReal-time RT-PCRで検討したところ、Gli1発現により特異的に、骨芽細胞初期の分化マーカーであるAlpおよびBspの発現が上昇した。shGli1によりGli1発現をノックダウンしたときの効果を検討した結果、SAGにより誘導されるAlpおよびBsp発現はGli1ノックダウンにより有意にその発現が減少した。以上の結果より、SAGによる骨芽細胞分化促進作用はGli1を介している可能性が示唆された。現在、Gli1ノックアウトマウスの解析を検討中である。2.マウス骨・軟骨欠損モデルに対する、骨・軟骨再生用多機能型インプラントの解析骨セメント中にSAGを含有した骨再生用インプラントを作製し、マウス骨欠損モデルに対する作用を検討した。マウス頭蓋骨に作製した臨界骨欠損モデル(直径5mm、トレパンにて作製)にインプラントを埋植し、4週間後に骨再生能を検討した。その結果、SAGによる有意な骨再生能は認められなかった。一方、同様のインプラントをラット大腿骨骨欠損モデル(直径3mm、ラウンドバーにて作製)に埋植し、2週間後に骨再生能を検討した。その結果、SAGにより皮質骨の再生が促進する傾向が認められた。以上の結果より四肢骨欠損に対してSAGは有用である可能性が示唆された。同様に、骨セメント中にTHを含有した骨再生用インプラントを作製し、マウス骨欠損モデルに対する作用を検討した。マウス頭蓋骨に作製した臨界骨欠損モデルにインプラントを埋植し、4週間後に骨再生能を検討した。その結果、THにより顕著な骨再生が認められた。現在、ラット大腿骨骨欠損モデルに対するTHの効果を検討中である。

1. Analysis of bone and cartilage formation of new candidate drugs (in vitro, in vivo analysis). The target gene is different from its preparation, etc.). The mRNA expression of Gli1, Gli2 and Gli3 in SAG exposed cells was increased in both the mRNA expression of Gli1 and the mRNA expression of Gli3 in SAG exposed cells. Gli2 mRNA, The expression of Gli-3 mRNA in a cell nucleus disappeared. The above results indicate that Gli1 and Gli3 are opposite to each other, and Gli2 is opposite to each other. In addition, the expression of each Gli gene was detected by Real-time RT-PCR after a certain period of culture, and the expression of RNA and Bsp was detected by Real-time RT-PCR. ShGli1, ShGli 1, ShGli 1, The above results indicate that SAG can promote the differentiation of bone bud cells through Gli1. Now, Gli1 2. The function of SAG in bone and cartilage regeneration is discussed. The critical bone damage mandelle (5mm in diameter, made in Torreponen) was implanted in the skull of Marusse, and the bone regeneration energy was evaluated after 4 weeks. The result of SAG is that the bone regeneration can be realized. Bone regeneration was evaluated at 2 weeks after implantation of the implant in the femoral bone defect group (diameter 3mm, diameter 3 mm). The results, SAG, and cortical bone regeneration were identified. The above results indicate that SAG is useful for limb damage. In the same way, the bone regeneration function is discussed. Bone regeneration after 4 weeks of implantation The result is that the bone regeneration is recognized. Now, the effects of TH on femoral bone damage are under discussion.

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Development of high-throughput screening system for osteogenic drugs using a cell-based sensor

DOI：
10.1016/j.bbrc.2008.08.167
发表时间：
2008-11-14
期刊：
BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS
影响因子：
3.1
作者：
Hojo, Hironori;Igawa, Kazuyo;Chung, Ung-il
通讯作者：
Chung, Ung-il

Interference by adrenaline with chondrogenic differentiation through suppression of gene transactivation mediated by Sox9 family members.

DOI：
10.1016/j.bone.2009.05.004
发表时间：
2009-09
期刊：
Bone
影响因子：
4.1
作者：
T. Takarada;H. Hojo;Mika Iemata;K. Sahara;Ayumi Kodama;N. Nakamura;E. Hinoi;Y. Yoneda
通讯作者：
T. Takarada;H. Hojo;Mika Iemata;K. Sahara;Ayumi Kodama;N. Nakamura;E. Hinoi;Y. Yoneda

Screening of Chondrogenic Factors With a Real-Time Fluorescence-Monitoring Cell Line ATDC5-C2ER Identification of Sorting Nexin 19 as a Novel Factor