ストレス応答破綻として捉えた心血管病の分子機構と、新たな治療法開発に関する研究

研究心血管疾病应激反应崩溃的分子机制及新疗法的开发

基本信息

批准号：
20590889
负责人：
井上信孝
金额：
$ 2.08万
依托单位：
National Cardiovascular Center Research Institute
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2010
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-20590889/
关键词：
酸化ストレス動脈硬化活性酸素 LOX-1 NADPH oxidase

项目摘要

酸化ストレスは、動脈硬化を基盤とした心血管病の発症に深く関与しており、心血管系における活性酸素産生源として、NAD(P)H oxidaseは一義的な働きをしている。また、LOX-1/NADPH oxidaseは、血小板にも機能的に発現しており(Thromb Res.2001;103:399-409)、血小板機能、血栓形成過程に重要な役割をしていることが考えられる。NAD(P)H oxidaseは、膜分画に存在するgp91phox、p22phox、細胞質分画に存在するp47phox、p67phox、p40phox、及びsmall G proteinであるracから構成されており、racの活性化とともに細胞質コンポーネントがリン酸化を受け、細胞膜にtranslocationし活性化される。また最近gp67phoxのホモログとしてNOXA-1が同定されたが、その機能的意義は不明である。そこで今回、我々は、血管内皮細胞における、このNOXA-1の重要性を、sRNAiを用いた系にて検討した。培養ヒト血管内皮細胞には、NOXA-1、LOX-1とも強発現していた。NOXA-1 sRNAi処置あるいは、抗LOX-1抗体前処置により、酸化LDL添加により活性酸素の産生は抑制された。このように、NOXA-1は、血管内皮細胞に機能的に発現しており、酸化ストレス制御のターゲットになると考えられた。我々は、HVJ liposome法によるin vivoにおけるTLR2、TLR4遺伝子導入の系を用いて、家兎動脈硬化モデルにおいて、TLRを介する系が動脈硬化を著明に促進することを明らかにした。現在、HVJ liposomeによる遺伝子導入法を用いたNOXA-1遺伝子導入系を、LOX-1遺伝子改変マウスに応用することにより、LOX-1/NADPH oxidaseを介する酸化ストレス系の相互関連を検討している。

氧化应激与基于动脉粥样硬化的心血管疾病的发展深深相关，而NAD（P）H氧化酶在心血管系统中起着独特的作用，作为活性氧的来源。此外，LOX-1/NADPH氧化酶也在血小板（ThrombRes。2001; 103：399-409）中表达，被认为在血小板功能和血栓形成过程中起重要作用。 NAD(P)H oxidase is composed of gp91phox and p22phox that are present in the membrane fraction, p47phox, p67phox, p40phox that are present in the cytoplasmic fraction, and rac, which are small G proteins that are present in the cytoplasmic fraction, and at the time of activation of rac, the cytoplasmic components are phosphorylated,并通过易位到细胞膜来激活。同样，NOXA-1最近被确定为GP67Phox的同源物，但其功能意义尚不清楚。因此，我们使用SRNAI研究了NOXA-1在血管内皮细胞中的重要性。 NOXA-1和LOX-1都在培养的人血管内皮细胞中强烈表达。 NOXA-1 SRNAI处理或抗LOX-1抗体预处理通过添加氧化LDL抑制了活性氧的产生。因此，NOXA-1在血管内皮细胞中功能表达，被认为是调节氧化应激的靶标。我们已经证明，使用HVJ脂质体法，体内TLR2和TLR4基因转移系统TLR介导的系统在兔动脉粥样硬化模型中显着促进了动脉粥样硬化。当前，我们正在研究通过使用HVJ脂质体应用NOXA-1基因转移系统介导的LOX-1/NADPH氧化酶介导的氧化应激系统的相关性，以lox-1转化为基因修饰的小鼠。