線維芽細胞由来人工万能細胞の心筋内皮への分化の検討と胚性幹細胞との比較

成纤维细胞来源的人工多能细胞向心肌内皮细胞分化的检测及与胚胎干细胞的比较

• 批准号: 20790724
• 负责人: 馬場 志郎
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-20790724/
• 关键词: iPS細胞; 心筋分化; 発生; 再生医療; ES細胞

未分化マウス線維芽細胞由来入工万能細胞(iPS細胞)をSNLフィーダー細胞上またはMEF細胞上で培養すると、マウス胚性幹細胞(ES細胞)とほぼ同様の形態で未分化維持培養が可能であった。この細胞をOP-9ストローマ細胞上で分化培養を開始した。分化後4日から5日後の分化細胞中のFlk1陽性細胞をFACSVantageで回収した。このFlk1陽性細胞をさらにOP-9ストローマ細胞上で分化継続するとマウスES細胞と同様に自動収縮する心筋コロニーが確認された。この収縮細胞が体外の不整脈診断治療に使用可能かどうか検討するため、自動収縮するコロニーに様々な心血管系作動薬を投与して、その収縮力や収縮頻度について検討した。使用薬剤はプロカインアミド、メキシレチン、フレカイニド、プロプラノロール、アミオダロン、ベラパミル、アドレナリン、イソプロテレノールを検討予定とした。結果、プロカインアミド、フレカイニドは収縮頻度に影響しないが、収縮力の低下を認めた。メキシレチンは収縮頻度、収縮力ともに影響しなかった。アミオダロンは収縮頻度が低下したが、収縮力には影響なかった。ベラパミルは収縮頻度、収縮力とも低下した。プロプラノロールは収縮頻度に影響はなかったが、収縮力は低下した。アドレナリンは収縮頻度、収縮力とも増大した。以上の結果から、心筋に対する薬物の反応分類で一般的に知られるVaughan Williams分類やScilian Gambit分類にほぼ準じた反応を示すことがわかった。一部の薬剤の評価が未だ行なわれていないので、今後更なる検討が必要であるが、マウスiPS細胞から分化させた心筋に対する心血管径作動薬は正常心筋細胞と同等であり、不整脈薬効果の体外診断に役立てる可能性が示唆された。

Undifferentiated マ ウ ス origin into work universal line d bud cells (iPS cells) を SNL フ ィ ー ダ ー cells ま た は MEF cells で cultivate す る と, マ ウ ス embryonic stem cells (ES cells) と ほ ぼ with others で undifferentiated maintain training が の form may で あ っ た. The <s:1> <s:1> cells をOP-9ストロ ストロ を で differentiate and culture を begin with <s:1> た. Four days after differentiation ら five days later, the <s:1> flK1-positive cells in the <s:1> differentiated cells をFACSVantageで were reproduced with <s:1> た. こ の Flk1 positive cells を さ ら に OP - 9 ス ト ロ ー マ で on cell differentiation 継 続 す る と マ ウ ス と ES cells with others に automatic 収 shrinkage す る heart muscle コ ロ ニ ー が confirm さ れ た. こ の 収 shrinkage in vitro cell が の is not the whole diagnosis and treatment of arteries and veins に use may か ど う か beg す 検 る た め, automatic 収 shrinkage す る コ ロ ニ ー に others 々 な cardiovascular department actuation 薬 を cast with し て, そ の 収 shrinkage force や 収 contraction frequency に つ い て beg し 検 た. Using 薬 tonic は プ ロ カ イ ン ア ミ ド, メ キ シ レ チ ン, フ レ カ イ ニ ド, プ ロ プ ラ ノ ロ ー ル, ア ミ オ ダ ロ ン, ベ ラ パ ミ ル, ア ド レ ナ リ ン, イ ソ プ ロ テ レ ノ ー ル を 検 for designated と し た. Results, プ ロ カ イ ン ア ミ ド, フ レ カ イ ニ ド は 収 contraction frequency に influence し な い が, low 収 shrinkage force の を め た. The frequency and force of the メキシレチ に と に contraction affect the <s:1> な った った. The frequency of ア ア ア ダロ ダロ ダロ ダロ が った low frequency of contraction が and the force of contraction に な affect な な った. The frequency and force of the ベラパ ベラパ and the ベラパ of the contraction are と and the low force of the contraction are and た. The frequency of プロプラノロ, プロプラノロ, に, に, the frequency of contraction and shrinkage に, に, な, ったが, and the contraction force <e:1> is low, <s:1>, た. The frequency and force of the アドレナリ and アドレナリ shrinkage increase by た. の above results か ら, heart muscle に す seaborne る 薬 content の anti 応 classification で general に know ら れ る Vaughan Williams classification や Scilian Gambit classification に ほ ぼ quasi じ た anti 応 を shown す こ と が わ か っ た. A の 薬 tonic の review 価 が line not だ な わ れ て い な い の で, future more な る beg が 検 necessary で あ る が, マ ウ ス iPS cells か ら differentiation さ せ た heart muscle に す seaborne る blood pipe diameter actuation 薬 は normal heart muscle cells と equal で あ り, not the whole pulse 薬 unseen fruit の in vitro diagnostic に servants made て が る possibility in stopping さ れ た.