权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

個体内単一ニューロン選択的遺伝子改変による機能解析法の開発

通过个体内单个神经元的选择性遗传修饰开发功能分析方法

基本信息

批准号：
20650047
负责人：
喜多村和郎
金额：
$ 2.05万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2009
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では、これまでに独自に開発した単一ニューロン選択的遺伝子改変法を用いて、脳内における単一ニューロンの機能解析を行うことを目的とする。これにより、動物個体内で単一ニューロンの機能/形態解析を直接行うことを可能にする。また、従来の遺伝子改変技術では達成不可能であった、脳内におけるただ一つのニューロンの機能改変法が可能になると期待される。昨年度までに、緑色蛍光タンパク質(EGFP)を用いて、大脳ニューロンにおいて発現効率が最大(約70%)となるような条件を見いだし、遺伝子を導入したニューロンからホールセル記録やカルシウムイメージングを行うための慢性記録用チャンバーを開発した。これにより、脳内で最大20個程度の特定のニューロンに選択的に遺伝子を導入する方法を確立した。これらの方法を用い、光活性型チャネルChannelrhodopsin-2を大脳皮質錐体細胞に発現させ、青色レーザーで刺激を行うことで、マウス脳内において特定のニューロンだけを活性化することに成功した。また、特定のニューロン活動を経時的にin vivoで可視化するためのカルシウムセンサープローブを導入することに成功した。これらの技術を組み合わせることで、脳内の任意の少数ニューロンを同時に刺激してその活動をモニターすることが可能となった。従来までの電極を用いる方法と比較して、任意のニューロンを時空間パターンを制御して刺激することが可能で、同時に活動をモニターできるという点で優れた方法である。

This study aims to develop a new method of genetic modification for the analysis of the function of a single cell in a single cell. The functional/morphological analysis of a single animal within an individual can be performed directly. It is impossible to change the function of the original technology, but it is impossible to change the function of the original technology. In the past year, green fluorescent protein (EGFP) was used in the middle of the year, and the maximum occurrence rate of large number of green fluorescent protein (EGFP) was reached (about 70%). The conditions for the introduction of green fluorescent protein (EGFP) were discussed. The introduction of green fluorescent protein (EGFP) was carried out in the middle of the year. The method of introducing the gene of the selected gene into the cell with a maximum of 20 levels is established. This method was successfully used to activate a specific protein in the cortex of large pyramidal cells. For example, when a specific activity is displayed in vivo, it is successfully displayed. The technology is combined with any number of activities within the system. The method for controlling the use of electrodes is compared with the method for controlling the use of electrodes at any time and space.