標識されていない神経細胞のin vivo可視化パッチクランプ法の開発と応用
未标记神经元体内可视化膜片钳方法的开发和应用
基本信息
- 批准号:18650086
- 负责人:
- 金额:$ 2.11万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Exploratory Research
- 财政年份:2006
- 资助国家:日本
- 起止时间:2006 至 2007
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
生きた状態の丸ごとの動物の脳において活動中の神経細胞からホールセル記録をとるための新しい方法の開発を行う。この方法では、細胞外領域に蛍光色素を導入し、2光子励起顕微鏡で脳内の神経細胞を"影"として可視化する。脳内の細胞外領域への蛍光色素の導入方法としては、パッチクランプ電極の内液に蛍光色素を含めておき、僅かな陽圧を電極にかけるだけで良く、細胞の蛍光標識や蛍光色素を前もって注入するなどの前処理を一切必要としない、非常に簡便な方法である。可視化された細胞に記録電極を近づけることで、目的の細胞からホールセル記録を行うことを可能にした。前年度までに、麻酔下のマウス大脳および小脳において目的の細胞を可視化してホールセル記録を行う方法の最適化を行い、大脳新皮質および小脳皮質の投射ニューロンや小型の介在ニューロンの細胞体や樹状突起から高い成功率でホールセル記録を行うことを可能にし、また、電気穿孔によって脳内の単一ニューロンへ蛍光色素やプラスミドDNAを導入することにも成功した。今年度は、この電気穿孔法の効率を向上させるため、与える電圧パルスの条件などを最適化し、70%以上の導入効率を達成した。また、GFPを電気穿孔で導入したニューロンの形態を数週間から1ケ月の長期にわたって観察することが可能であることを示した。
In the middle of the activity, there is a new method to start the operation of the animal. The method is used to detect light pigments in the extracellular domain, and 2 photons excite the cells in the microphone to activate the light pigments. In the extracellular field, the photoligmentation method is used to determine the concentration of light pigments in the electrophoresis. the photolytic pigments in the internal solution of the superoxide disulfide contain the antioxidants, only the electrodes, the electrodes, and the cells recognize that the light pigments are injected into the cell before the light pigments are injected into the cell, and all the necessary methods are used to determine whether they are necessary. It is possible to change the computer record of the computer. The computer is very close to the computer, and the purpose of this is that the record may be bad. In the previous year, in the previous year, it was possible to optimize the new skin, the small skin, the projection of the cell, the high success rate, the new skin, the small skin, the new skin, the small skin, the cell body, the cell body, the cell The electrical perforation system has been successfully loaded with light pigments, light pigments, and DNA. This year, the electrical energy consumption rate of the piercing method for this year's electric power plant is higher than that of the electric power plant, which is in line with the environmental conditions of this year's electric power plant, and the enrollment rate is higher than 70%. The perforated electrical equipment and GFP electrical equipment can be entered into the thermal transmission network for a long period of time over a period of more than one month.
项目成果
期刊论文数量(1)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Targeted patch-clamp recordings and single-cell electroporation of unlabeled neurons in vivo
- DOI:10.1038/nmeth1150
- 发表时间:2008-01-01
- 期刊:
- 影响因子:48
- 作者:Kitamura, Kazuo;Judkewitz, Benjamin;Hausser, Michael
- 通讯作者:Hausser, Michael
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喜多村 和郎
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