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ラボイモリの生産とトランスジェニックライン作製技術の開発

拉博森的生产及转基因品系生产技术的开发

基本信息

批准号：
20650060
负责人：
千葉親文
金额：
$ 2.3万
依托单位：
University of Tsukuba
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2010
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では、実験用アカハライモリ(ラボイモリとトランスジェニックイモリ)の大規模な生産・維持技術の確立を目指す。本年度は、1.ラボイモリの養育条件と繁殖条件の決定、2.トランスジェニック条件の決定、3.RPE65プロモーター配列の決定、および4.FGFR機能不全イモリ作製、を目標とした。1においては、8月に32匹の雌から得た589匹の幼生(第1グループ)を変態抑制条件下で2年間飼育した後、生存した87個体を通常飼育水に移し変態させた。現在、20匹が生存しており、再生能力に異常のないことを確認した。これにより、変態抑制条件下で正常に発生する個体のスクリーニングに成功し、今後これらをラボイモリとして繁殖させる。一方、2月に4匹の雌から得た252匹の幼生(第2グループ)を変態抑制条件下で2年半継続して飼育している。生存率が高く、形態異常もほとんど観察されないため、さらに継続して飼育し、幼生形態のまま繁殖させる。2については、効率のよいトランスジェニック技術を確立し、GFPイモリ系統を得た。さらにメタロチオネイン・プロモーターを組み込んだコンストラクトを作製し、トランスジェニックによりイモリ体内で重金属により活性化されることが分かった。条件付き発現系の1つとして更なる有効性の評価を行う。3については、イモリゲノムライブラリーからの単離に成功し、トランスジェニックにより活性を評価している。4については、網膜色素上皮(RPE)細胞由来の幹細胞で、2種類のFGFR-1アイソフォームと1種類のFGFR-2アイソフォームが発現することが分かった。また、RPE細胞の細胞周期進入や分化転換にMEK1/2-ERK1/2経路の活性が必須であることや、ヘパリンが影響する様々な因子が関わることが明らかになった。今後、トランスジェニック技術と組み合わせて、これらの機能解析を行う。

The purpose of this study is to ensure that the objectives of the maintenance technology are determined by the use of large-scale model maintenance technology. This year, 1. To determine the breeding conditions and reproductive conditions, 2. It is necessary to ensure that the conditions are determined, that the configuration of the 3.RPE65 is determined, that the 4.FGFR machine is not fully operational, and that the target is not fully operational. A total of 589 young babies (the first female) were reared for 2 years under the condition of state inhibition, and 87 survival eggs were usually reared in water after two years of incubation under the condition of state inhibition. At present, there are 20 survivors, and the ability to regenerate is not uncommon. Under the condition of health check and state suppression, the normal health system has been successful, and in the future, it has been reproduced in the future. One party, four females in February, got 252 babies (the second one). Under the condition of state inhibition, they were given birth for two and a half years. The survival rate is high, the morphology is constant, the survival rate is high, the morphology is constant, the survival rate is high, and the survival rate is high. 2. Make sure that the technology is established and that the GFP system is successful. In the body, the heavy metals in the body are activated. The conditional payment is due to the fact that there is a lot of sex in the market. 3. Please tell me that you are successful, and that you are active. 4. The origin of the cells of the membrane pigment epithelium (RPE), the cells of the membrane pigment epithelium (RPE), the cells of the FGFR-2 cells, the cells of the FGFR-2 pigment epithelium (FGFR-2), the cells of the membrane pigment epithelium (RPE), and the cells of the FGFR-2 pigment epithelium (RPE). After entering the cell cycle of differentiation, RPE and RPE cells, the activity of MEK1/2-ERK1/2 pathway must be affected by cell cycle differentiation, cell cycle, cell cycle and cell cycle. In the future, you will need to know that the technical organization will be able to analyze the industry.

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Musashi-1, an RNA-binding protein, is indispensable for survival of photorecentors

Musashi-1 是一种 RNA 结合蛋白，对于光感受器的生存是不可或缺的

DOI：
发表时间：
2009
期刊：
Experimental Eye Research 88
影响因子：
0
作者：
Casco-Robles;M.M.;Jun Kaneko;Kanako Susaki
通讯作者：
Kanako Susaki

成体イモリの網膜色素上皮細胞の細胞周期進入に対するFGF2とshhの効果

FGF2和shh对成体蝾螈视网膜色素上皮细胞进入细胞周期的影响

DOI：
发表时间：
2009
期刊：
影响因子：
0
作者：
Casco-Robles;M.M.;Jun Kaneko;Kanako Susaki;Chikafumi Chiba;三浦智也;水野亜季;吉川太朗;井波航;Md.Rafiqul Islam;カスコマルティン;千葉親文;千葉親文;吉川太朗
通讯作者：
吉川太朗

成体イモリ網膜再生の細胞・分子メカニズム

成体蝾螈视网膜再生的细胞和分子机制

DOI：
发表时间：
2009
期刊：
影响因子：
0
作者：
Casco-Robles;M.M.;Jun Kaneko;Kanako Susaki;Chikafumi Chiba;三浦智也;水野亜季;吉川太朗;井波航;Md.Rafiqul Islam;カスコマルティン;千葉親文;千葉親文;吉川太朗;井波航;水野亜季;金子潤;千葉親文;吉川太朗;井波航;山崎博人;水野亜季;鈴木隆文;鈴木隆文;千葉親文
通讯作者：
千葉親文

成体イモリ網膜色素上皮細胞は培養下でPax6を発現するか

成年蝾螈视网膜色素上皮细胞在培养物中是否表达 Pax6？