ミトコンドリア活性に伴う細胞内温度変化の計測とその生理学的意義に関する研究

线粒体活性相关细胞内温度变化的测量及其生理意义研究

• 批准号: 20657027
• 负责人: 森 泰生
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-20657027/
• 关键词: 温度センサー; coiled-coil; 蛍光タンパク質; ミトコンドリア; GFP

現在作成している温度センサーは37℃付近の温度変化を感知できるが、細胞内の微小な温度変化を検出するにおいて、励起イメージング(ratio380/480)の変化量の不十分さが問題点として挙げられた。そこで、感度向上を目指してcircular permutation法(Tsien et al, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1999)を採用し、新たな温度センサーを構築した。この方法ではGFPのN末端及びC末端をβシート構造近傍に移動することで、構造変化が蛍光変化としてより反映されやすい方法論になっている。In vitroで機能評価を行ったところ、蛍光変化の向上が確認でき、coiled-coilによる構造的な歪みがより強くなったためだと考えられる。また、本年度は、nativeの細胞を用いて温度産生の有無について評価した。褐色脂肪細胞は、交感神経線維の支配を受け、β3受容体の活性化を介してミトコンドリア内の脱共役タンパク(UCP)を活性化し、熱産生を行うことが知られる。そこで、ラットから単離した褐色脂肪細胞の温度変化を測定した。そのためには、褐色脂肪細胞への遺伝子導入系の確立が必要であるため、センサータンパク質の遺伝子をコードするアデノウィルスの構築を行い、作製したアデノウィルスを用いて、褐色脂肪細胞内におけるセンサータンパク質の発現を確認した。褐色脂肪細胞内における温度センサー機能に関しては、細胞外液の温度を変えることで評価した。また、脱共役剤として知られるCCCPおよびβ受容体のアゴニストであるノルエピネフリン刺激によって、褐色脂肪細胞の蛍光変化を評価した。

Now the temperature temperature is 37 ℃, the temperature is 37 ℃, the temperature is small, the temperature is small, the temperature is low, the temperature is low, the temperature is 37 ℃, the temperature is 37 ℃. The circular permutation method (Tsien et al, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1999) low temperature, low temperature. The GFP N-terminal and C-terminal β-terminal were used to create a proximal mobile phase sensor and a photosensitive sensor to reflect the temperature response method. The In vitro machine is able to make sure that the information is verified, and that the error created by the coiled-coil system is not valid. The temperature of this year, this year and native has been used to give birth to the baby. Brown fat cells, sympathetic nerves dominate receptor, β 3 receptor activation, activation and activation. The temperature of brown fat cell changes the temperature of the cell. Make sure that you need to make sure that you need to make sure that you have the necessary information, that is, you need to make sure that you have the necessary information, that you need to make sure that you have the necessary information, that you need to make sure that you are using brown fat, that you need to make sure that you are using brown fat. Brown fat, intracellular temperature, extracellular fluid, temperature, temperature. They were exposed to CCCP, β-receptacle, β-receptacle, and brown fat.

项目成果

Molecular characterization of flubendiamide sensitivity in lepidopterous ryanodine receptor Ca^<2+> release channel.

鳞翅目兰尼碱受体Ca ^ 2 释放通道中氟虫酰胺敏感性的分子表征。

• 发表时间: 2009
• 期刊: Biochemistry 48
• 作者: Kato K;Kiyonaka S;Sawa-guchi Y;Tohnishi M;et al.
• 通讯作者: et al.

A Pathogenic C Terminus-truncated Polycystin-2 Mutant Enhances Receptor-activated Ca2+ Entry via Association with TRPC3 and TRPC7*

• DOI: 10.1074/jbc.m109.015149
• 发表时间: 2009-10
• 期刊: The Journal of Biological Chemistry
• 作者: K. Miyagi;Shigeki Kiyonaka;Kazunori Yamada;T. Miki;E. Mori;Kenta Kato;T. Numata;Yuichi Sawaguchi;T. Numaga;Toru Kimura;Y. Kanai;M. Kawano;M. Wakamori;H. Nomura;I. Koni;M. Yamagishi;Y. Mori

Selective and direct inhibition of TRPC3 channels underlies biological actvities of a pyrazole compound.

TRPC3 通道的选择性和直接抑制是吡唑化合物生物活性的基础。

• 发表时间: 2009
• 期刊: Proc. Natl. Acad. Sci. USA 106
• 作者: Kiyonaka S.;他19名;Mori Y.
• 通讯作者: Mori Y.

Ca2+ influx and protein scaffolding via TRPC3 sustain PKCβ and ERK activation in B cells

• DOI: 10.1242/jcs.061051
• 发表时间: 2010-03-15
• 期刊: JOURNAL OF CELL SCIENCE
• 影响因子: 4
• 作者: Numaga, Takuro;Nishida, Motohiro;Mori, Yasuo
• 通讯作者: Mori, Yasuo

Integration of calcium signals by TRP channel some

TRP 通道对钙信号的整合

• 发表时间: 2008
• 作者: Yamanishi Y;Kitaura J;Izawa K;Kaitani A;Komeno Y;Nakamura M;Yamazaki S;Enomoto Y;Oki T;Akiba H;Abe T;Komori T;Morikawa Y;Kiyonari H;Takai T;Okumura K;Kitamura T.;森泰生
• 通讯作者: 森泰生