エルゴチオネインのビタミン機能の解明

阐明麦角硫因的维生素功能

• 批准号: 20658028
• 负责人: 貫名 学
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: Yamagata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-20658028/
• 关键词: エルゴチオネイン; ビタミンC; 抗酸化物質; キノコ

1.エルゴチオネイン(ERT)は主に高速液体クロマトグラフ(HPLC)で定量的に分析できるが、ERT含量の微量な生体由来抽出液では夾雑物が大量に存在するため難しい。今回、超高性能液体クロマトグラフを連結した質量分析計(UPLC-ESI-MS)によるERTの迅速な分析について検討した。HPLCで常用しているC30を用いたUPLC用の超高圧カラムが未開発で使用できず、常用のODSではERTはフロントとほぼ同じ位置で溶出された。精密質量によるピーク検出と同定は可能であるが、定量は難しいと思われる。また水-CH3CNを用いるHILICカラムについても検討したが、使用方法が難しく十分な手法の確立には至っていない。キノコ、鳥レバー、ブタ肉、牛肉についてはERTを検出したが、穀物と野菜類のERTについては実施できなかった。今回HPLC法により新たにウシグソヒトヨタケの子実体形成過程の原基形成から柄の成長と傘の成熟過程などの諸段階のERTの定量に成功し、菌糸体や柄には少なく原基から傘の部分にERT含量が高いことがわかった。2.ERT量の細胞内での変化を老化との関係を追跡する実験は定量的な超微量定量法が確立できず実施できなかった。3.ERTの化学的性質の解明はERTのビタミン機能に関わると考えられる。これまでの研究でERTはDPPHとのラジカル反応により1:1のERT-DPPH結合体を形成し、S-N結合またはN-N結合により連結していることは分かっていたが正確な構造は不明であった。今年度詳細にMS/MS解析を行った結果、S-N結合と思われる結果が得られた。4.ERT結合性を持つ生体成分は、ERTのビタミン機能を解明する鍵と思われる。ERTを高含有するキノコのタモギタケの抽出液について再現実験を行った結果、ERTは少なくともその一部は何らかの生体分子と相互作用をしておりメルカプトエタノール(ME)処理により遊離することが確認された。また今回、動物細胞系の鳥レバーについても検討した結果ME処理によりERT量の増大が見られ、動物細胞系におけるERT結合成分解明への大きな糸口が得られた。

1. Quantitative analysis of ERT by high-speed liquid chromatography (HPLC) is difficult, and trace amounts of ERT content in bio-derived extracts are difficult to detect due to the presence of large amounts of impurities. In this paper, ultra-high performance liquid quality analyzer (UPLC-ESI-MS) for rapid analysis of ERT HPLC is commonly used for C30, UPLC is used for ultra-high pressure detection, and ODS is used for ERT detection. Precision quality is the same, quantitative is difficult. HILIC is used to detect and determine the method of use.キノコ、鸟レバー、ブタ肉、牛肉についてはERTを検出したが、谷物と野菜类のERTについては実施できなかった。This paper describes the quantitative analysis of ERT in the different stages of the growth and maturation of the protoplast by HPLC. 2. Trace the relationship between ERT and intracellular aging, and establish quantitative ultra-micro quantitative method. 3. The chemical properties of ERT are explained in detail. In this study, the ERT-DPPH complex was formed by 1:1 ERT-DPPH reaction, S-N binding, N-N binding, and the correct structure was unknown. This year's MS/MS analysis results, S-N combination results 4. ERT binding property, biological composition, ERT function, key to understand. The results of ERT high concentration and high concentration in the extract solution were reproduced. ERT low concentration and high concentration of some of the bio-molecular interactions were identified. In this paper, animal cell line and bird culture in the middle of the study results in ME treatment in the amount of ERT increased, animal cell line ERT synthesis and decomposition of the large number of results.

项目成果

自生キノコ中のエルゴチオネインの分析

野生蘑菇中麦角硫因的分析

• 发表时间: 2008
• 作者: 田辺舞;貫名学
• 通讯作者: 貫名学