E-カドヘリンプロセス分子のNaked DNAを用いた口腔癌の遺伝子治療法の開発

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これまでに,プラスミンが,細胞間接着分子のE-カドヘリンを細胞間接着活性部位が存在する細胞外ドメインで切断することで,細胞間接着を抑制し細胞凝集能を低下させ,扁平上皮癌の細胞遊走を亢進していることを見いだし,プラスミノーゲン/プラスミン系がE-カドヘリンの重要なプロセシング調節因子であることをしていることを明らかにしてきた.これらの知見から,プラスミノーゲン/プラスミン系を抑制することで,扁平上皮癌の浸潤・転移を阻止することが期待された.本研究では,扁平上皮癌細胞のプラスミノーゲン/プラスミン系抑制するため,ヒト肝臓のmRNA(American Type Culture Collectionより購入)より,RT-PCRにてプラスミノーゲン/プラスミン系阻害分子であるα2-アンチプラスミン遺伝子のopen reading frameを増幅し,α2-アンチプラスミンcDNAが組み込まれた哺乳細胞発現プラスミドベクターを構築した.このプラスミドを扁平上皮癌細胞に導入し,細胞の凝集能,増殖能及び細胞遊走能に与える影響をin vitroにて検索するとともに,in vivoでの増殖能を解析し,以下の結果を得た.α2-アンチプラスミン遺伝子導入は,プラスミノーゲン/プラスミン系による扁平上皮癌細胞のE-カドヘリンのプロセシングを抑制し,扁平上皮癌細胞の細胞凝集能を亢進させた.α2-アンチプラスミン遺伝子を導入した扁平上皮癌細胞は,コラーゲンゲルへの浸潤能が低下するとともに,ヌードマウスでの造腫瘍能が低下した.