ヒト線維芽細胞からの癌浸潤促進因子の分離

从人成纤维细胞中分离癌症侵袭促进因子

• 批准号: 05771549
• 负责人: 林堂 安貴
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05771549/
• 关键词: 細胞浸潤; 蛋白分解酵素; 上皮-間葉相互作用

我々はこれまで、in vitro浸潤モデルを用い口腔扁平上皮癌細胞の浸潤機構の解析を行なってきた。その結果、ヒト正常歯肉由来線維芽細胞の産生する液性因子が扁平上皮癌細胞の遊走能と蛋白分解活性を促進することを見い出した。今回、線維芽細胞の培養上清より癌細胞の遊走促進因子と蛋白分解活性促進因子の分離・精製を試みた。ヒト正常歯肉由来線維芽細胞を無血清培地で培養して得られた条件培地を限界濾過で濃縮後、蒸留水にて透析したものを凍結乾燥し、Superdex 200pgゲルクロマトグラフィーカラム、ヘパリン親和性クロマトグラフィー及びMono Q陰イオン交換クロマトグラフィーカラムにFPLCシステムを用い展開・溶出させた。その結果、癌細胞に対し強いchemotaxis活性を示す50〜70kDaの画分と癌細胞のウロキナーゼ型プラスミノーゲンアクチベータ-(u-PA)とゼラチナーゼ産生を亢進させる200〜300kDaの画分が分離された。今後、これらの因子の精製をすすめ、モノクローナル抗体の作製を計画している。

The analysis of invasion mechanism of oral squamous cell carcinoma cells in vitro As a result, the production of normal dental derived vascular cells and the promotion of migration and proteolytic activity of squamous cell carcinoma cells by liquid factors have been reported. The culture supernatant of the present and future vascular bud cells is used to isolate and purify the migration promoting factor of cancer cells and the protein decomposition activity promoting factor. Normal tooth derived cells were cultured in serum-free medium, concentrated in conditioned medium, dialyzed in distilled water, freeze-dried, Superdex 200pg, affinity, and affinity. The results showed that the activity of chemotaxis in cancer cells was 50 ~ 70kDa, and the activity of chemotaxis in cancer cells was 200 ~ 300kDa. In the future, the purification of these factors and the preparation of these antibodies will be planned.

项目成果

Y.HAYASHIDO: "Effect of Epidermal Growth Factor on Invasion of Human Squamous Cell Carcinoma Cells into Collagen Gel" CANCER JOUNAL 4. 4. 257-261 (1991)

Y.HAYASHIDO：“表皮生长因子对人鳞状细胞癌细胞侵入胶原蛋白凝胶的影响”癌症杂志 4. 4. 257-261 (1991)

K.SHIRASUNA: "Extracellular Matrix Production and Degradation by Adenoid Cystic Carcinoma Cells:Participation and of Plasminogen Activator and Its Inhibitor in Matrix Degradation" CANCER RESEARCH. 53. 147-152 (1993)

K.SHIRASUNA：“腺样囊性癌细胞的细胞外基质产生和降解：纤溶酶原激活剂及其抑制剂在基质降解中的参与”癌症研究。