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睡眠中の海馬活性化の記憶固定に於ける意義

睡眠期间海马激活在记忆巩固中的意义

基本信息

批准号：
21650080
负责人：
林康紀
金额：
$ 2.05万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

睡眠中の海馬神経回路再活性化の記憶固定における意義を明らかにする為に必要な技術開発と条件検討を行なった。Archをなるべく数多くのCA1錐体細胞に効率よくかつ長期間発現する条件を探った。この為ウイルスベクター(AAV、ヘルペスウイルス)、子宮内電気穿孔法、トランススジェニックによる発現を検討した。子宮内電気穿孔法は毒性も無く広範囲に発現したが、およそ20%程度の細胞しか発現せず、効率の向上が必要である。AAVは、CMVプロモーターを用いた所、グリア細胞にも多く入り神経特異性が無かった。FLEXカセットとCA1細胞にCreを発現するマウスを組み合わせた物を利用することで選択性の向上が期待できる。CaMKIIプロモーターを用いたトランスジェニック動物も数ラインのファウンダーが得られた。また、発現量を向上させるために、テトラサイクリン反応因子(TRE)の下流にArchをおいたラインも作成した。Archを活性化するための光源も選定を行なった。LEDは多数の光源と光ファイバーを用い海馬の広い領域を照射することが出来るが、実験した所発熱が問題となった。そのため冷却水還流する事を試みた。レーザーは光源の数を増やすのが難しい一方で、光源は動物から離れた所にあるため発熱は問題にならない。光量はどちらの場合も充分であるのが分かったため。また一方で、Edward BoydenらがArchの高活性変異体を作成するのに成功したため、この変異体を使う事で光源は一つでも充分学習の抑制が観察される事も期待された。Archの抑制範囲の確認のためには、最初期遺伝子産物であるArcを免疫染色する事により検出する事を試みた。コントロール動物を新規環境下においてArcの誘導を観察した。

The memory fixation method of reactivating the hippocampal neurocircuit during sleep means that it is a necessary technology to develop conditions and conditions. ArchをなるべくThe number of CA1 pyramidal cells is high and the efficiency is long-term.この为ウイルスベクター(AAV,ヘルペスウイルス), uterus Internal electric perforation method, トランススジェニックによる発 appear を検した. Intrauterine electroporation method has no toxicity, no need to use 20% cells, and no need to improve efficiency. AAV は, CMV プロモーターを Use いた, グリアCell にも多くり神経Specific が无った. FLEX カセットCA1 cell にCre を発appears するマウスをgroup み合わせた物をutilize することで选択性の上がLook forward to できる. CaMKII プロモーターを用いたトランスジェニックAnimal も number ラインのファウンダーが got られた.また、発综合を上させるために、テトラサイクリンReaction Factor (TRE) の流にArchをおいたラインも成した. Archをactivationするためのlight sourceもselected rowなった. Most of the LED light sources are used in the area of the sea horse, and the problem of heat is caused by irradiation and heat. The cooling water is still flowing and the cooling water is still flowing.レーザーは光源のnumberを Increaseやすのが多しい一方で、光源はAnimalから出れた所にあるため発热はquestionにならない. The amount of light depends on the occasion and the amount of light is sufficient.また方で、Edward BoydenらがArchのHighly active variant をmadeするのにsuccessしたため、この変different body を使う事で光源は一つでも fully learned の榳Observation される事もexpect された. Arch's inhibitory effect is confirmed by the immunostaining of the original product of the early stage of the disease.コントロールAnimal をUnder the new regulatory environment においてArcのinducing を観看した.