動脈硬化発症に関与する、血管内皮細胞特異的な新規ペア型レセプターの同定と解析

(1)動脈硬化を惹起する液性傷害因子(フリーラジカル、酸化脂質)や機械的ストレス、および生理活性因子(VEGF、HGF、FGF、アンギオポイエチン)など各種刺激を血管内皮細胞に加え、ペア型レセプターの発現量変化をレセプター特異的モノクローナル抗体で測定し、動脈硬化病変に置いて、どのような機序でペア型レセプターの発現調節がなされているかを明らかにした。(2)モノクローナル抗体を用いて、血管内皮細胞上のレセプターに架橋刺激を行い、細胞内のシグナル伝達経路を明らかにした。(3)モノクローナル抗体によるレセプターの架橋刺激によって、血管内皮細胞の増殖・分化、遊走、接着、透過性亢進、抗アポトーシスなど生理現象を観察し、ペア型レセプターが動脈硬化病変に及ぼす影響を明らかにした。(4)ペア型レセプターの細胞外領域とヒトIgG1のFc部分の融合蛋白質(プローブ)を作製し、プローブを指標としてペア型レセプターのリガンド発現細胞を検索し、発現クローニング法により内因性リガンドを同定した。(5)得られたリガンドのレセプターへの親和性や特異性を、共沈実験、BIAcore解析、モノクローナル抗体やプロープによる競合実験により確認した。(6)レセプターへのリガンド刺激によって、抗体による架橋刺激と同様のシグナル伝達や生理現象が血管内皮細胞に生じるかを観察し、生理的リガンドであることを明らかにした。

(1)動脈硬化を惹起する液性傷害因子(フリーラジカル、酸化脂質)や機械的ストレス、および生理活性因子(VEGF、HGF、FGF、アンギオポイエチン)など各種刺激を血管内皮細胞に加え、ペア型レセプターの発現量変化をレセプター特異的モノクローナル抗体で測定し、動脈硬化病変に置いて、どのような機序でペア型レセプターの発現調節がなされているかを明らかにした。(2)モノクローナル抗体を用いて、血管内皮細胞上のレセプターに架橋刺激を行い、細胞内のシグナル伝達経路を明らかにした。(3)モノクローナル抗体によるレセプターの架橋刺激によって、血管内皮細胞の増殖・分化、遊走、接着、透過性亢進、抗アポトーシスなど生理現象を観察し、ペア型レセプターが動脈硬化病変に及ぼす影響を明らかにした。(4)ペア型レセプターの細胞外領域とヒトIgG1のFc部分の融合蛋白質(プローブ)を作製し、プローブを指標としてペア型レセプターのリガンド発現細胞を検索し、発現クローニング法により内因性リガンドを同定した。(5)得られたリガンドのレセプターへの親和性や特異性を、共沈実験、BIAcore解析、モノクローナル抗体やプロープによる競合実験により確認した。(6)レセプターへのリガンド刺激によって、抗体による架橋刺激と同様のシグナル伝達や生理現象が血管内皮細胞に生じるかを観察し、生理的リガンドであることを明らかにした。