免疫レセプターTREM1のリガンド同定と敗血症制御への応用

免疫受体TREM1配体的鉴定及其在脓毒症控制中的应用

• 批准号: 26893063
• 负责人: 山西 吉典
• 金额: $ 0.92万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2014
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2014-08-29 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-26893063/
• 关键词: 免疫学; 免疫レセプター

本研究の目的を達成するため、平成２６年度は以下の研究計画を遂行した。１、未知のTREM1リガンドを同定するため、レトロウイルスを用いた発現クローニングを行った。まずTREM1-Fc融合キメラ蛋白を用いてマウス由来のTREM1リガンド発現細胞を同定し、この細胞からcDNAライブラリーを作製した。得られたcDNAライブラリーをリガンド非発現細胞株にレトロウイルスベクターで導入した。一部の細胞株はライブラリー中に含まれるリガンドのcDNAが導入されることで、リガンド発現細胞へと形質転換するため、この細胞をTREM1-Fcの結合を指標にソーティングした。こうして得られた細胞株のゲノムを回収し、導入されたcDNAを解析した結果、TREM1リガンドの候補分子を同定した。２、得られたリガンド候補分子がTREM1の機能的リガンドとして作用するか検証した。TREM1リガンド候補分子のFc融合蛋白を作製し、可溶性リガンドとしてTREM1の刺激に用いた。また、CHO細胞や293T細胞の細胞表面にTREM1リガンド候補分子を過剰発現させ、膜性リガンドとして利用した。TREM1を発現するマクロファージおよび好中球をエフェクター細胞として用い、可溶性／膜性TREM1リガンド候補分子の刺激によりTREM1に関連したシグナル伝達（ERK, p38, JNK, AKTのリン酸化)や炎症性サイトカイン、ケモカインの産生が誘導されるか検討した。そして、これらの現象が抗TREM1抗体によるTREM1阻害、およびsiRNAによるTREM1のノックダウンによって抑制されるか検証し、リガンド候補分子のTREM1に対する機能的特異性を確認した。

The objectives of this study were achieved and the following research projects were carried out in 2006. 1. Unknown TREM1 release is determined by the same method. The TREM1-Fc fusion protein is used to control the expression of TREM1 protein in cells. The cDNA sequence was transformed into a non-emergent cell line. A number of cell lines contain the cDNA for TREM1-Fc binding. The results of cDNA analysis and identification of TREM1 candidate molecules were analyzed. 2. The candidate molecules are selected for TREM1 function. TREM1 is a candidate molecule for Fc fusion protein production, soluble release and stimulation of TREM1. In addition, CHO cells and 293T cells were used to detect TREM1 protein candidate molecules on the cell surface. TREM1 expression is associated with the stimulation of TREM 1 candidate molecules (ERK, p38, JNK, AKT) and the induction of inflammatory cytokines and inflammatory response. These phenomena include TREM1 inhibition by anti-TREM 1 antibodies, detection of TREM1 inhibition by siRNAs, and confirmation of specificity of TREM1 function by candidate molecules.

项目成果

IL-3 induces the expression of G-protein-coupled receptors on basophils, leading to their infiltration to tick-feeding site.

IL-3 诱导嗜碱性粒细胞上 G 蛋白偶联受体的表达，导致其浸润到蜱虫进食部位。

• 发表时间: 2014
• 作者: Takuya OHTA;Soichiro YOSHIKAWA;Noriko OKAYAMA;Kenji ISHIWATA;Kayoko YAMAJI;Kayo HORIGUCHI;Lihua LI;Yoshinori YAMANISHI;Hirotaka KANUKA;Naohiro WATANABE;Hajime KARASUYAMA.
• 通讯作者: Hajime KARASUYAMA.

TREM2 mutations implicated in neurodegeneration impair cell surface transport and phagocytosis

• DOI: 10.1126/scitranslmed.3009093
• 发表时间: 2014-07-02
• 期刊: SCIENCE TRANSLATIONAL MEDICINE
• 影响因子: 17.1
• 作者: Kleinberger, Gernot;Yamanishi, Yoshinori;Haass, Christian
• 通讯作者: Haass, Christian

Ceramide-CD300f binding suppresses experimental colitis by inhibiting ATP-mediated mast cell activation.

• DOI: 10.1136/gutjnl-2014-308900
• 发表时间: 2016-05
• 期刊: Gut
• 影响因子: 24.5
• 作者: Matsukawa T;Izawa K;Isobe M;Takahashi M;Maehara A;Yamanishi Y;Kaitani A;Okumura K;Teshima T;Kitamura T;Kitaura J
• 通讯作者: Kitaura J

Molecular mechanism underlying Ca2+ influx due to IgE/antigen stimulation in basophils

嗜碱性粒细胞中 IgE/抗原刺激导致 Ca2+ 内流的分子机制

• 发表时间: 2014
• 作者: Yoshikawa;S.;Ohora;M.;Miyake;K.;Li;L.;Horiguchi;K.;Ohta;T.;Adachi;T.;Yamanishi;Y.;Karasuyama;H.
• 通讯作者: H.

GM-CSF-elicited basophils have increased capacity for antigen presentation

GM-CSF 诱导的嗜碱性粒细胞抗原呈递能力增强

• 发表时间: 2014
• 作者: Miyake;K. Nagao;T.;Yahagi;Y.;Numazaki;T.;Yoshikawa;S.;Yamanishi;Y.;Karasuyama;H.
• 通讯作者: H.