Ras-Raf-ERK経路新規抑制因子Spredの生理機能解析

Ras-Raf-ERK通路抑制剂Spred的生理学分析

• 批准号: 09J03319
• 负责人: 岡元 冬樹
• 金额: $ 0.9万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09J03319/
• 关键词: チロシンキナーゼ; ノックアウト; コンディショナルノックアウト; 貪食; LTB_4; FcγR; クロストーク; MAPキナーゼ; 造血; ノックアウトマウス; ミスセンス変異; 神経繊維種症1型様疾患

Spredはチロシンキナーゼ型受容体シグナルを抑制する細胞膜関連タンパク質である。Spredの生体内での機能を解明するためにノックアウト(KO)モデルが作られている。Spred-1、Spred-2は機能相補が考えられ、Spredの生理機能が詳細に解明されていない。そこでSpred-1,2の両欠損マウスが作製されたが、胎生致死のため問題は解決されなかった。そのため、部位特異的に両欠損マウスを作製することが必要とされる。今年度は、Spred-1コンディショナルKO(cKO)マウスを作製、解析を行い、顕著な表現型を呈した。一方、マクロファージによる貪食は宿主防御に必要不可欠である。マクロファージはイムノグロブリンG(IgG)でオプソニン化された物体をFcγRの機能により貪食する。ロイコトリエンB_4(LTB_4)はアラキドン酸由来の古典的な走化性因子である。高親和性のLTB_4受容体BLT1は好中球、マクロファージなどの多様な免疫細胞に発現している。LTB_4はマクロファージの貪食を促進するが、これについての詳細な細胞内メカニズムは明らかとなっていない。FcγR依存的な貪食が野生型マクロファージに比べてBLT1欠損マクロファージで減弱することを明らかにした。さらに、LTB_4-BLT1シグナルとIgG-FcγRシグナルはSykの下流のPI3KとRacでクロストークしていることが明らかとなった。加えて、BLT1依存的な貪食には3量体Gタンパク質(Gi)が必須であった。興味深いことに、LTB_4-BLT1シグナルがFcγRシグナル欠損下での貪食を回復することを見出した。これらのことよりLTB_4-BLT1シグナルはマクロファージの貪食、自然免疫において中心的な役割を果たしている事が示された。

SPRS是一种与细胞膜相关的蛋白，可抑制酪氨酸激酶型受体信号。已经创建了敲除（KO）模型，以阐明SPRED的体内功能。 SPRED-1和SPRED-2被认为是功能互补的，并且尚未完全了解SPR的生理功能。因此，产生了SPRED-1和2的小鼠，但由于胚胎生命的死亡而无法解决问题。因此，有必要以特定地点的方式产生两种缺陷的小鼠。今年，准备并分析了SPRED-1条件KO（CKO）小鼠，并表现出突出的表型。另一方面，巨噬细胞的吞噬作用对于宿主防御至关重要。巨噬细胞通过FCγR的功能吞噬用免疫球蛋白G（IgG）调子的对象。白三烯B_4（LTB_4）是衍生自蛛形酸的经典趋化因子。高亲和力LTB_4受体BLT1在多种免疫细胞（例如中性粒细胞和巨噬细胞）中表达。 LTB_4促进巨噬细胞吞噬作用，但详细的细胞内机制尚不清楚。我们发现，与野生型巨噬细胞相比，在BLT1缺陷型巨噬细胞中衰减FcγR依赖性吞噬作用。此外，揭示了Syk下游PI3K和RAC之间的LTB_4-BLT1信号和IgGFCγR信号串扰。另外，三聚体G蛋白（GI）对于BLT1依赖性吞噬作用至关重要。有趣的是，我们发现LTB_4-BLT1信号在FcγR信号缺乏下恢复了吞噬作用。这些结果表明，LTB_4-BLT1信号在巨噬细胞吞噬和先天免疫中起着核心作用。

项目成果

マクロファージ貧食におけるロイコトリエンB4受容体(BLT1)の機能解析

白三烯B4受体(BLT1)在巨噬细胞吞噬作用中的功能分析

• 发表时间: 2010
• 作者: Taniguchi K;他5名;Okamoto F;他7名;Yoshimura A.;岡元冬樹
• 通讯作者: 岡元冬樹

Suppression of Sproutys has a therapeutic effect for a mouse model of ischemia by enhancing angiogenesis.

• DOI: 10.1371/journal.pone.0005467
• 发表时间: 2009
• 期刊: PloS one
• 影响因子: 3.7
• 作者: Taniguchi K;Sasaki K;Watari K;Yasukawa H;Imaizumi T;Ayada T;Okamoto F;Ishizaki T;Kato R;Kohno R;Kimura H;Sato Y;Ono M;Yonemitsu Y;Yoshimura A
• 通讯作者: Yoshimura A