生殖腺非依存的な脳の性分化機構の解明

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本研究は、分子生物学的・組織学的解析を通じて、発生期の脳の性分化や形態形成におけるSteroidogenic factor 1(SF-1)という転写因子の役割を明らかにすることを目的としている。実験動物にはこれまでと同様、ニワトリを用いた。鳥類は過去の知見より生殖腺の性に非依存的な脳の性分化機構の存在が示唆されている。これまでの研究から、生殖腺に性差が現れる前の時期である発生初期(3-6.5日胚)の脳において、SF-1 mRNAの発現が明瞭にみられ、さらにその発現部位が間脳の腹側に限局するという新たな知見を得ている。この結果を受けて2年度以降から本年度までの間は、SF-1 mRNAの発現がその後、発生後期にわたってどのような挙動を示すのかをRT-PCR法やin situ hybridization法を用いて解析した。結果、発生期を通して間脳でのみSF-1 mRNAが発現することが示唆できた。加えてSF-1関連因子として、性ステロイドホルモン情報伝達系に関わるものや性分化関連因子など数個について、同様の方法を用いた発現解析を行った。その結果、RT-PCRのレベルでは脳で数因子の発現が確認されたため、これらがSF-1と関連し発生期の脳形成に重要な役割を担っている可能性が考えられたが、発現部位の同定までは至らなかった。また、SF-1発現部位の形態学的解析として、発生期における神経核形成の概要を捉えるため、クラシルバイオレットを用いた染色を行った。その結果、孵化直前の胚の脳では、成体の脳に近い神経核形成が成されていることがわかった。さらに転写因子としてのSF-1の役割を考察するため、タンパク質レベルでの解析を行えるよう、抗体の作製を進めた。今後は抗体を用いてこれらの発現部位を明確にすることで、本研究の目的である発生期の脳におけるSF-1の役割を考察することが可能となると考えられる。