エピジェネティクスに基づく脳の性分化メカニズムの解明

基于表观遗传学阐明大脑性别分化机制

基本信息

批准号：
09J08918
负责人：
橋本隆
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Kyoto Prefectural University of Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2011
项目状态：
已结题

项目摘要

エピジェネティクスに基づく外傷後ストレス障害(PTSD)の病態解明22年度より開始した本実験ではPTSDの動物モデルであるSPSラットを使用し、脳内のストレス関連因子の発現解析を行ってきた。海馬におけるグルココルチコイド受容体の発現変化は認められなかった。ストレス反応の要となるHPA軸においても、CRHの発現変化は捉えられなかったが、不安反応に関与深いする扁桃体領域においてCRHの発現上昇を示唆する結果を、定量的real time PCR法、酵素抗体法による組織染色およびimageJ画像解析より得た。この結果は、PTSD発症後情動記憶の中枢である同領域において、不安惹起作用を示すCRHの発現異常が定常状態で起こっていることを示し、再負荷された急性ストレスに対する応答性についても影響を与えている可能性が考えられた。そこで23年度は作出されたPTSDモデルラットに対して強制水泳を再負荷し、ストレスや不安行動に関連する室傍核(PVN)、分界条床核(BNST)、扁桃体中心角(CeA)の三つの領域においてCRHの発現レベルを免疫組織化学的に調査した。ストレス再負荷2時間後において、PTSDモデルラットはコントロールラットと比較してPVN、CeAにおいて有意差を認めなかったものの、BNSTにおいて有意に高いCRH免疫陽性反応を認めた。本結果よりCeA-BNST間の神経繊維連絡を通したCRHの分泌異常が予想され、不安様関連行動の増加を伴なうPTSD病症の、内分泌学的理解に繋がると考えられる。なお、前年度申請書記載の「扁桃体CRH発現異常のエピジェネティクスに基づく分子基盤解明」については、1)DNAメチル化について、ChIPおよびバイサルファイトシークエンス法に調査中、2)行動試験については、不安様行動関連の評価に沿い高架式十字迷路試験を検討中である。

基于表观遗传学的阐明创伤后应激障碍（PTSD）该实验于2010年始于2010年，它使用了PTSD动物模型SPS大鼠分析大脑中应激相关因子的表达。在海马中未观察到糖皮质激素受体表达的变化。尽管在HPA轴上未观察到CRH表达的变化，这是应力反应的关键，但结果表明，与焦虑反应有关的杏仁核区域中CRH表达的增加是通过定量实时PCR，使用酶抗体的组织染色和图像J图像分析获得的。该结果表明，表现出焦虑作用的CRH异常表达发生在同一区域，PTSD发作后的情绪记忆中心区域发生在稳定状态，并且认为它也可能对急性应力的反应性产生影响。因此，在2013年，在生产的PTSD模型大鼠上重新加载了强迫游泳，免疫组织化学研究了与压力和焦虑行为有关的三个区域中CRH的表达水平：旁腔内核（PVN），边界谱系床核（BENST）和中央amygdala角（CEA）。与对照大鼠相比，应力加载后两个小时，PTSD模型大鼠在PVN或CEA上没有显着差异，但在BNST中观察到CRH免疫阳性反应明显更高。这些结果预测CRH通过CEA和BNST之间的神经纤维通信异常分泌，从而导致对PTSD疾病的内分泌理解，伴随着与焦虑样相关行为的增加。关于上一年的申请表，“基于杏仁核CRH表达异常的表观遗传学的分子基础的地球学”目前正在使用ChIP和Bisulfite测序方法研究DNA甲基化，而2）当前正在考虑与评估焦虑症评估焦虑的交叉迷宫测试。