权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

βバレル構造を有する疎水性低分子輸送リポカリンタンパク質の構造と機能の相関

β-桶结构疏水性小分子转运脂质运载蛋白的构效关系

基本信息

批准号：
09J10176
负责人：
宮本優也
金额：
$ 1.79万
依托单位：
Osaka Prefecture University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2011
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では,リポカリン型プロスタグランジンD合成酵素(L-PGDS)を用いた新規ドラッグデリバリーシステムの構築を目指している。これまでに,本蛋白質が,脳虚血時に神経細胞死抑制効果を持つことが知られている難水溶性薬剤NBQXの水溶液中の濃度を向上させ,NBQX/L-PGDS複合体の静脈内投与により,前脳虚血を施したスナネズミの海馬CA1領域における遅発性神経細胞死を抑制できることが見い出されている。本DDSのヒトへの応用にはヒト由来L-PGDSの使用が望まれるが,ヒト由来L-PGDSの難水溶性薬剤結合機序は解明されていない。昨年度に引き続き,本年度はヒト由来L-PGDSの立体構造の精密化,および本蛋白質と難水溶性薬剤NBQXの相互作用の解析を行った。多次元NMRスペクトル解析することによりヒト由来L-PGDSの立体構造計算を行ったところ,本蛋白質は8本のβストランドから構成されるβバレル構造と1本の3_<10>ヘリックス,2本のαヘリックスを持つことが判明した。次に,^1H-^<15>N HSQCスペクトルを用いてL-PGDSに対するNBQXの滴定実験を行った結果,NBQX濃度の増加とともに,いくつかのHSQCシグナルが屈曲を伴いながらシフトした。滴定曲線をtwo site binding modelを用いて解析した結果,2つの結合部位における解離定数は,それぞれ10.4μM,及び1170μMと求められた。1つ目,及び2つ目のNBQX結合によるケミカルシフト変化の情報を基に,HADDOCKプログラムにより複合体のモデル構造を計算したところ,ヒト由来L-PGDSは2分子のNBQXをβバレル内部に結合することが判明した。以上の結果から,L-PGDSは複数の難水溶性薬剤をβバレル内部に結合できることが判明し,この特性は本蛋白質のDDSのキャリヤーとしての可能性を強く示鎖している。

In this study, L-PGD synthetic enzyme, L-PGD S) をいた新码ドラッグデリバリーシステムのconstructed を目 Refers to している.これまでに, this protein has an inhibitory effect on cell death when the patient is deficient in blood, and the concentration in the aqueous solution of NBQX is high, NBQX/L -Intravenous administration of PGDS complex The CA1 area is the same as the suppression of neuronal cell death. This DDS is based on the use of L-PGDS, which is a poorly water-soluble glucosamine binding machine. Last year's work was carried out, and this year's work was based on the refinement of the three-dimensional structure of L-PGDS and the analysis of the interaction between the original protein and the poorly water-soluble drug NBQX. Multidimensional NMR spectrometry analysis, origin of L-PGDS, three-dimensional structure calculation, and this protein's 8 original β Structural structureと1本の3_<10 >ヘリックス, 2 のαヘリックスをholding つことが见明した. Time,^1H-^<15>N HSQC titration using titration L-PGDS titration of NBQX, N BQX concentration is added to the HSQC HSQC concentration. The titration curve of the two site binding model was analyzed using the results of the analysis, and the dissociation number of the 2 binding site was determined by 10.4 μM, and 1170 μM. 1 item, and 2 items NBQX combined with HADDOCK HADDOCK complex The calculation of the structure of the のモデデをしたところ, the origin of the のNBQX をβバレル internal combination of the 2 molecules of L-PGDS was determined by the した. The above results indicate that L-PGDS is a complex complex of poorly water-soluble chlorine and β-glucuronide. It has been found out that the characteristics of this protein and the possibility of DDS of this protein are strong and strong.

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

NMR and CD analysis of an intermediate state in the thermal unfolding process of mouse lipocalin-type prostaglandin D synthase

小鼠脂质运载蛋白型前列腺素 D 合酶热解折叠过程中间态的 NMR 和 CD 分析

DOI：
10.1093/jb/mvr140
发表时间：
2012
期刊：
The Journal of Biochemistry
影响因子：
0
作者：
Miyamoto;Y.;Noda;Y.;Iida;T.;Yamaguchi;K.;Nishimura;S.;Tanaka;A.;Segawa;S.;Inui;T.
通讯作者：
T.

研究成果

研究结果

DOI：
发表时间：
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

Structural analysis of lipocalin-type prostaglandin D synthase complexed with biliverdin by small-angle X-ray scattering and multi-dimensional NMR.

通过小角 X 射线散射和多维 NMR 分析与胆绿素复合的脂质运载蛋白型前列腺素 D 合酶的结构。

DOI：
发表时间：
2010
期刊：
J. Struct. Biol.
影响因子：
0
作者：
Miyamoto;Y.;Nishimura;S.;Inoue;K.;Shimamoto;S.;Yoshida;T.;Fukuhara;A.;Yamada;M.;Urade;Y.;Yagi;N.;Ohkubo;T.;and Inui;T. (correspondence author)
通讯作者：
T. (correspondence author)

Drug delivery system for poorly water-soluble compounds using lipocalin-type prostaglandin D synthase