エンドサイトーシス制御における低分子量G蛋白質Rab5結合蛋白質RIN3の機能解

低分子量G蛋白質であるRab5は細胞膜から初期エンドソームに向けての膜小胞輸送であるエンドサイトーシスの制御において中心的役割を担う非常に重要な因子である。当研究室ではこれまでに新規Rab5結合因子RIN3を同定し、RIN3がRab5を活性化することを明らかにしてきたが、その詳細な制御機構は不明である。私はRIN3がその分子内にリン酸化チロシンと結合するSH2ドメインを持つことに着目し、細胞内のチロシンリン酸化シグナルとの関係を探索した。まず、チロシンリン酸化依存的にRIN3に結合する制御因子の存在が考えられたため、チロシンキナーゼの基質であり、かつ小胞輸送に関与していることが報告されている因子を過去の知見から探し、293T細胞に過剰発現させて非特異的チロシンホスファターゼ阻害剤処理時のRIN3との結合を免疫沈降により検討した。その結果、癌原遺伝子c-Srcの基質であり、アクチン制御蛋白質であるCortactinがRIN3と結合した。また、Cortactinと結合することが知られているアクチン関連蛋白質CD2APもまたRIN3と結合することが見出された。CortactinおよびCD2APに関する知見から、RIN3はがん細胞の移動に関与している可能性があると考え、ヒト線維肉腫細胞株であるHT1080を用いてRIN3の局在を観察したところ、RIN3とCortactinは膜ラッフル部から内在化する小胞に、RIN3とCD2APは内在化した小胞においてそれぞれ共局在した。本研究は膜小胞輸送と細胞骨格制御を結び付ける基礎的な知見のみならず癌の浸潤機構の解明などにつながる可能性があり、大変意義深いものと考えられる。

低分子量G蛋白質であるRab5は細胞膜から初期エンドソームに向けての膜小胞輸送であるエンドサイトーシスの制御において中心的役割を担う非常に重要な因子である。当研究室ではこれまでに新規Rab5結合因子RIN3を同定し、RIN3がRab5を活性化することを明らかにしてきたが、その詳細な制御機構は不明である。私はRIN3がその分子内にリン酸化チロシンと結合するSH2ドメインを持つことに着目し、細胞内のチロシンリン酸化シグナルとの関係を探索した。まず、チロシンリン酸化依存的にRIN3に結合する制御因子の存在が考えられたため、チロシンキナーゼの基質であり、かつ小胞輸送に関与していることが報告されている因子を過去の知見から探し、293T細胞に過剰発現させて非特異的チロシンホスファターゼ阻害剤処理時のRIN3との結合を免疫沈降により検討した。その結果、癌原遺伝子c-Srcの基質であり、アクチン制御蛋白質であるCortactinがRIN3と結合した。また、Cortactinと結合することが知られているアクチン関連蛋白質CD2APもまたRIN3と結合することが見出された。CortactinおよびCD2APに関する知見から、RIN3はがん細胞の移動に関与している可能性があると考え、ヒト線維肉腫細胞株であるHT1080を用いてRIN3の局在を観察したところ、RIN3とCortactinは膜ラッフル部から内在化する小胞に、RIN3とCD2APは内在化した小胞においてそれぞれ共局在した。本研究は膜小胞輸送と細胞骨格制御を結び付ける基礎的な知見のみならず癌の浸潤機構の解明などにつながる可能性があり、大変意義深いものと考えられる。