多光子励起顕微鏡と量子ドットを用いたANCA関連血管炎の腎臟イメージング解析

使用多光子激发显微镜和量子点对 ANCA 相关血管炎进行肾脏成像分析

• 批准号: 21790377
• 负责人: 長尾 朋和
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2011
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21790377/
• 关键词: 免疫学; ANCA関連血管炎; 糸球体腎炎; 量子ドット; 自己抗体; 好中球

1.多光子励起顕微鏡を用いたマウス腎糸球体観察法の確立昨年度作製法を確立したmaMPOを量子ドット(Qdot)で標識したもの(maMPO-Qdot)を調製し、簡易的に倒立型蛍光顕微鏡で、maMPO-Qdot投与後におけるその腎臓内分布を凍結切片上で観察。その結果、微弱ながら腎臓におけるmaMPO-Qdotの蛍光を観察したが、傾向強度は微弱であった。そこで現在、量子ドット以外に通常の有機蛍光化合物も利用したmaMPOをラベリングしたmaMPOの生体内分布を継続中。2.maMPOの腎炎誘導活性評価maMPOとLPSの併用によるC57BL/6マウスの半月体性糸球体腎炎モデルについて、腎臓切片のHE染色・PAS染色・蛍光免疫染色、腎臓中のmRNA発現の定量PCR解析を行った。その結果、LPSの単独投与によって、主に好中球と考えられるGr-1+細胞の糸球体への浸潤が見られたが、maMPOの単独投与ではそのような変化が見られなかった。また、好中球、マクロファージの浸潤に関与する接着分子ICAM-1、ケモカインKC、MCP-1などの腎臓におけるmRNA発現を検討したところ、LPSの投与によって有意に増加することを確認した。従って、LPSによる好中球浸潤に加え、maMPO投与による好中球の活性化が血管傷害の主たる原因であることが推察された。3.In vitroにおける糸球体血管内皮細胞、maMPO、好中球の相互作用maMPOによる糸球体血管内皮細胞の直接的活性化メカニズムに関わる新規抗原分子Moesinを同定し、maMPOがMoesinに交差反応で結合。血管内皮細胞に活性化シグナルを伝達している事を明らかにした。

1. Multiphoton excitation up 顕 micromirror を with い た マ ウ ス renal si sphere 観 examine method の method established last year as を establish し た maMPO を quantum ド ッ ト (Qdot) mark で し た も の (maMPO Qdot を し modulation type, simple に handstand 蛍 顕 light cast with the micro mirror で, maMPO - Qdot に お け る そ の renal viscera を freeze in distribution Youdaoplaceholder0 on the section. Youdaoplaceholder0 <s:1> results, weak ながら renal におけるmaMPO-Qdot <s:1> 蛍 light を観 examination たが たが, propensity intensity <s:1> weak であった. そ こ で now, quantum ド ッ ト に commonly の organic compounds も 蛍 light using し た maMPO を ラ ベ リ ン グ し た maMPO の born in vivo distribution を 継 続. 2. MaMPO の nephritis induced activity evaluation 価 maMPO と LPS の and に よ る C57BL / 6 マ ウ ス の demilune crescentic glomerulonephritis モ si sphere デ ル に つ い て is crucial, renal biopsy の HE staining, PAS staining, 蛍 optical immune dyeing, renal viscera の mRNA 発 line is の quantitative PCR analytic を っ た. そ の results, LPS の 単 alone the VCS and に よ っ て, main に good in ball と え ら れ る Gr - 1 + cells の si sphere へ の infiltrating が see ら れ た が, maMPO の 単 alone the VCS and で は そ の よ う な variations change が see ら れ な か っ た. ま た, good in ball, マ ク ロ フ ァ ー ジ の infiltrating に masato and す る molecule ICAM - 1, then ケ モ カ イ ン KC, MCP - 1 な ど の renal viscera に お け る mRNA 発 を now beg し 検 た と こ ろ, LPS の cast with に よ っ て intentionally に raised plus す る こ と を confirm し た. 従 っ て, LPS に よ る good ball infiltrates in に with え, maMPO shots, and に よ る の activeness in good が vascular damage の main た る reason で あ る こ と が push examine さ れ た. 3.In vitroにおける spherosphere vascular endothelial cells, maMPO, good spherosphere spherosphere spherosphere spherosphere spherosphere spherosphere spherosphere spherosphere spherosphere spherosphere spherosphere spherosphere spherosphere directly activated メカニズムに related to わる new regulation antigen molecule Moesinを with fixed <s:1>, maMPOがMoesinに cross and reverse 応で binding. に vascular endothelial cell activation シ グ ナ ル を 伝 da し て い る matter を Ming ら か に し た.

项目成果

Dietary enrichment with eicosapentanoic acid(EPA) prevents antineutrophil cytoplasmic antibody(ANCA)-associated vasculitis

富含二十碳五酸（EPA）的膳食可预防抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）相关性血管炎

• 发表时间: 2009
• 作者: Yamada Y.;Watanabe A;Kazuo Tomizawa;長尾朋和;Kazuo Tomizawa;Junichi Hirahashi
• 通讯作者: Junichi Hirahashi

Involvement of Interleukin-6 in RPGN of SCG/Kj mice

Interleukin-6 在 SCG/Kj 小鼠 RPGN 中的参与

• 发表时间: 2009
• 作者: Yamada Y.;Watanabe A;Kazuo Tomizawa;長尾朋和;Kazuo Tomizawa;Junichi Hirahashi;Kazuo Suzuki;長尾朋和;Reina Kusunoki
• 通讯作者: Reina Kusunoki

MPO-ANCA関連血管炎と血管内皮細胞

MPO-ANCA相关性血管炎与血管内皮细胞

• 发表时间: 2009
• 期刊: 腎と透析 68
• 作者: Seki M;Watanabe A;他;長尾朋和
• 通讯作者: 長尾朋和

Risk Epitopes of MPO-ANCA in patients with MPA in Japan

日本 MPA 患者 MPO-ANCA 的风险表位

• 发表时间: 2009
• 作者: Yamada Y.;Watanabe A;Kazuo Tomizawa;長尾朋和;Kazuo Tomizawa;Junichi Hirahashi;Kazuo Suzuki
• 通讯作者: Kazuo Suzuki

抗MPO抗体刺激による活性化血管内皮細胞由来のケモカインの役割

抗 MPO 抗体刺激的活化血管内皮细胞来源的趋化因子的作用

• 发表时间: 2009
• 作者: Yamada Y.;Watanabe A;Kazuo Tomizawa;長尾朋和;Kazuo Tomizawa;Junichi Hirahashi;Kazuo Suzuki;長尾朋和
• 通讯作者: 長尾朋和