虚血内皮細胞における低酸素誘導分子ADAMTS1の重要性

缺氧诱导分子 ADAMTS1 在缺血内皮细胞中的重要性

• 批准号: 10F00118
• 负责人: 大塚 愛二
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 2011
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10F00118/
• 关键词: 低酸素; ADAMTS1

我々のこれまでの研究から低酸素におけるADAMTS1の発現ならびにADAMTS1プロモーター領域の解析を行ってきた過程で、低酸素によりADAMTS1が誘導されることは明らかとなった。しかし、リコンビナントADAMTS1タンパクを投与した実験からADAMTS1は血管新生を阻害する方向に働くことが示されているので、何故血管新生阻害分子が低酸素状況で必要なのかという疑問が起こってきた。そこで、低酸素状態における内皮細胞におけるADAMTS1の発現誘導がどのような生物学的役割を持っているか明らかにするためノックアウトマウス(以下KOマウス)を作成して、分子機能の解明を行うこととした。ADAMTS1 KOマウスを作成し、下肢虚血モデルにおけるADAMTS1役割を検討した。まず、ADAMTS1 KOヘテロマウスをかけあわせてホモマウスを作成した。ホモマウスは生後24時間以内で高率に死亡するため、実験に供するホモマウスがなかなか得られなかった。平成23年3月時点でホモマウスは4匹生存。死亡の原因を探るため、胎生18.5日のembryoを摘出し遺伝子型を探索したところ、野生型:ヘテロ:ホモ=およそ1:2:1となりメンデル遺伝に合致したので、少なくとも胎生後期までは生存していることが示された。本年度の研究結果よりADAMTS1 KOマウスは生後まもなく死亡する可能性が高く、そのメカニズムについては体色が蒼白であることより、血液・循環器系に異常があることが示された。組織学的検索では肺には異常は見られず呼吸機能には影響がない可能性が考えられた。(1)ADAMTS1の低酸素誘導システムにGFP(緑色蛍光タンパク)を付加したベクターによる急性期虚血組織の診断の可能性について検討した。麻酔下にマウス下肢虚血モデルを作成し、ADAMTS1 GFPベクターの発現を検討したところ、GFPシグナルが認められた。この結果より、虚血・低酸素により、GFPタンパクの発現が誘導されたと考えられた。(2)ADAMTS1 KOマウスにおける血管系構築に関して検討するADAMTS1 KOマウスの胎児腹部皮膚における血管系構築に関して検討した。CD31陽性細胞領域を検討したが、野生型と比較して有意な差は認められなかった。さらに、舌におけるCD31陽性細胞数を検討したが、こちらにも両者間に差は認めなかった。これらの検討過程において、新生児は死亡するが胎児には大きな発生学的異常は認められないことが明らかとなった。

I 々 の こ れ ま で の research か ら low acid element に お け る ADAMTS1 の 発 now な ら び に ADAMTS1 プ ロ モ ー タ ー line field analytical を の っ て き で た process, low acid に よ り ADAMTS1 が induced さ れ る こ と は Ming ら か と な っ た. し か し, リ コ ン ビ ナ ン ト ADAMTS1 タ ン パ ク を cast with し た be 験 か ら ADAMTS1 は angiogenesis を resistance against す る direction に 働 く こ と が shown さ れ て い る の で, somehow angiogenesis inhibitor molecules が low acid element condition で necessary な の か と い う doubt が up こ っ て き た. そ こ で, low acid element state に お け る endothelial cells に お け る ADAMTS1 の 発 now induced が ど の よ う な biology "を cut a っ て い る か ら Ming か に す る た め ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス (KO マ ウ ス) を made し て, molecular functional の interpret を line う こ と と し た. ADAMTS1 KO ウスを ウスを creates a <s:1>, lower limb deficiency blood モデ における における におけるADAMTS1 cut を検 to seek a た in battle. Youdaoplaceholder0, ADAMTS1 KOヘテロ ウスを ウスを けあわせてホモ ウスを ウスを ウスを are made as た た. ホ モ マ ウ ス は に で high rate within 24 time after birth death す る た め, be 験 に for す る ホ モ マ ウ ス が な か な か have ら れ な か っ た. At the time point of March 23, Heisei 23, there were 4 horses alive in でホモ ウス ウス. Death の reason を agent る た め, viviparous 18.5 days の embryo を pick the し heritage 伝 sub-type を explore し た と こ ろ, wild type: ヘ テ ロ : ホ モ = お よ そ 1:2:1 と な り メ ン デ ル heritage 伝 に close to し た の で, less な く と も viviparous late ま で は survival し て い る こ と が shown さ れ た. This year の results よ り ADAMTS1 KO マ ウ ス は postnatal ま も な く death す る high possibility が く, そ の メ カ ニ ズ ム に つ い て は body color が pale で あ る こ と よ り, blood circulator is abnormal に が あ る こ と が shown さ れ た. Histological 検 cord で <s:1> lung に <s:1> abnormal <e:1> られず られず respiratory function に えられた influence がな がな possibility が examination えられた. (1) ADAMTS1 の low acid induced シ ス テ ム に GFP (light green 蛍 タ ン パ ク) を plus し た ベ ク タ ー に よ る acute stage blood virtual organization の diagnostic possibilities の に つ い て beg し 検 た. Under the hemp 酔 に マ ウ ス lower limb blood deficiency モ デ ル を し, consummate ADAMTS1 GFP ベ ク タ ー の 発 を now beg し 検 た と こ ろ, GFP シ グ ナ ル が recognize め ら れ た. The <s:1> <s:1> results よ よ, hypoglycemic によ <e:1>, and GFPタ パ パ <s:1> are manifested in が induction されたと examination えられた. (2) ADAMTS1 KO マ ウ ス に お け る vascular system constructing に masato し て beg す 検 る ADAMTS1 KO マ ウ ス の tire where abdominal skin に お け る vascular system constructing に masato し て beg し 検 た. In the field of CD31-positive cells, を検 discusses を検 たが, wild-type と, <s:1> て is more interested in な than <s:1> is more interested in められな った った. The number of さらに and におけるCD31 positive cells in the tongue を検 is discussed for <s:1> たが, and the に difference between <s:1> and ちらに is recognized for めな に った った. Beg process こ れ ら の 検 に お い て, where new は death す る が tire where に は big き な abnormal は 発 raw learn to recognize め ら れ な い こ と が Ming ら か と な っ た.

项目成果

ADAMTS1 plays roles in endothelial cell apoptosis

ADAMTS1 在内皮细胞凋亡中发挥作用

• 发表时间: 2011
• 作者: Obika;et al.
• 通讯作者: et al.

ADAMTS1 induces apoptosis on endothelial cells

ADAMTS1 诱导内皮细胞凋亡

• 发表时间: 2010
• 作者: Seki;et al.;Satoshi Hirohata;Hatipoglu Omer Faruk;Hatipoglu Omer Faruk
• 通讯作者: Hatipoglu Omer Faruk

ADAMTS1は腫瘍壊死因子刺激下の内皮細胞におけるアポトーシスに関連する

ADAMTS1 与肿瘤坏死因子刺激下内皮细胞凋亡相关

• 发表时间: 2011
• 作者: オメル・ファルク・ハティポール;小比賀真就;廣畑聡;小川弘子;メフメット・ゼェイネル・チレッキ;稲垣純子;大月孝志;石井裕子;幡中邦彦;草地省蔵;米澤朋子;大橋俊孝;二宮善文
• 通讯作者: 二宮善文

ADAMTS1のin vitroでのリンパ管新生阻害効果

ADAMTS1 的体外淋巴管生成抑制作用

• 发表时间: 2011
• 作者: 稲垣純子、高橋克之、小川弘子、Omer F. Hatipoglu;M. Zeynel Cilek,小比賀真就、米澤朋子、大橋俊孝、廣畑聡、二宮善文
• 通讯作者: M. Zeynel Cilek,小比賀真就、米澤朋子、大橋俊孝、廣畑聡、二宮善文

Altered Expression of Hypoxia Response in Ischemic Hind Limb in ADAMTS1 Hetero Mice

ADAMTS1 异种小鼠缺血后肢缺氧反应表达的改变

• 发表时间: 2012
• 作者: Cilek;et al.
• 通讯作者: et al.