乳酸菌のメタボリックフィンガープリンティングおよびプロファイリング

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ブルガリアおよび日本でヨーグルト生産に用いられているLactobacillus乳酸菌(実用乳酸菌)および実験室乳酸菌計8株を供試菌とし,プロバイオティクスとして具備すべきヒト消化管環境ストレスに対する耐性試験(耐酸性,ペプシン耐性,胆汁酸耐性,汎用食品保存剤および抗生物質に対する耐性)を実施し,実用乳酸菌の一つL.gasseri(S20株)が検討項目全てに対して最も耐性が高く,L.helveticus,L.bulgaricus,L.acidophillusの順で耐性の低下傾向が認められた.得られた耐性結果を踏まえてストレス下の乳酸菌におけるメタボローム解析を行なった.1.基本培地として乳酸菌の実験用培地MRS培地を用いた場合に,L.gasseriおよびL.bulgaricusの代謝物プロファイルが他の株とは異なる挙動を示した.しかし,脱脂粉乳培地での培養乳酸菌において検出された代謝物は主に,カルボン酸アミノ酸,糖類,アミン類で,菌種間の差は小さく,むしろ同じL.bulgaricusのブルガリア由来菌株と日本産市販ヨーグルト分離乳酸菌との間で、分離度が最も大きかった.2.各添加薬剤に対する最小阻止濃度(MIC)の1/2量のストレス強度環境下の乳酸菌を用い,各株のストレス応答としての代謝物変動の比較を行なった.各種ストレスにおいて株間分離が得られたケースについて,さらにOPLS-DA解析を行ない,その分離に寄与している可能性のある化合物を複数見出した.しかし,それらの化合物についての再現性や検証に至れず,今後の課題として残った.3.ストレス応答時の代謝物プロファイルの比較では,ストレス耐性結果で注目されたL.gasseri(S20株)と他種乳酸菌との明らかな分離は今回の実験においては見出せなかった.