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コンビケムを用いた糖鎖認識ペプチドリガンドの取得

使用 Combichem 获得碳水化合物链识别肽配体

基本信息

批准号：
12019242
负责人：
福崎英一郎
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

細胞表層の糖鎖の細胞間認識への関与は明らかであり、糖鎖のタンパク質による分子認識機構の解明の重要性が増してきた。ところが、タンパク質・タンパク質間の分子認識と異なり、糖とタンパク質の結合様式は水素結合に大きく依存しており、特異的レセプターの取得も一般に困難である。本研究では、糖鎖認識機構解明の一助として糖鎖を認識するペプチド配列を取得することを目的とした。また、ファージディスプレイライブラリーから水素結合〓たる結合様式であるペプチドリガンドを取得するための方法論の確立を目的とした。認識様式が水素結合に大きく依存し、分子認識が困難である中性糖(キチンあるいはセルロース)をターゲットとした。ペプチドライブラリーとして、繊維状ファージの表面抗原にランダムペプチドを提示したファージディスプレイランダムペプチドライブラリーを用いた。(1価型および5価型の両者を使用した。)パニングを行う際のマトリクスとして、疎水性相互作用の少ない、親水性マトリクスを用いた。chito-oligoagaroseをターゲットとして、5価型ファージライブラリーをスクリーニングしたところ、ラウンドを重ねる度に宿主大腸菌への感染率の低下が観測された。マトリクスを磁気ビーズに変えた場合にも同様の傾向が認められた。そこで、繊維状ファージのg3p抗原にトリプシンインヒビターの一部分を融合タンパク質として提示し、突起部分にランダムペプチド配列を有する1価型のライブラリーに変更した。パニングに際し、疎水性相互作用による非特異吸着を減じるために、60%EtOHで洗浄を行い、尿素溶出により回収した。6ラウンド終了後のファージをSPRセンサーチップ表面に固定化し、オリゴキチンとの相互作用を調べたところ、特異的吸着が認められた。

The cell table shows that there is an understanding of the importance and importance of the importance of sugar in the cell, and that there is a clear understanding of the importance of the importance of sugar. In the middle of the war, in the combination of water and water in the combination of large-scale drug-dependent drugs, and special drugs in general. The purpose of this study is to provide information on how to achieve the purpose of this study by providing information on how to achieve the purpose of this study. In order to determine the purpose of the method, the method of the combination of water, water and water, water, The combination of water in the form of knowledge, which is highly dependent and molecular, is sensitive to neutral sugars (neutral sugars). Please tell me that the surface antigen is the surface antigen, and the surface antigen is the surface antigen. (type 1, type 5, type 1, type 5, type, and type.) Please tell me that there is less water-based interaction, less water-based interaction, less water-based interaction and less water-based interaction. Chito-oligoagarose virus infection rate is low, infection rate is low, infection rate is low. I don't know what to do. I don't know what's going on. There is a part of the fusion and protuberance of G3P antigens, G3p antigens, G3P antigens, G3p antigens, G3P antigens, fusion Water-based interaction, water-based interaction, water-based interaction, 6. After SPR, the surface is immobilized, the interaction is immobilized, and the adsorption is special.