新規光シート顕微鏡を用いたマウス初期胚における核のエレベーター運動解析

点击翻译按钮获取中文摘要

マウス初期胚を生きたまま光シート型顕微鏡で観察する系を構築した。光シート型顕微鏡は欧州分子生物学研究所のE. Stelzerらのグループが近年開発に成功した蛍光顕微鏡の一種であり、シート状の光で試料をスキャンし、照射光と垂直な方向から検出することによって比較的厚さのある試料でもその3次元像を取得することが可能である(Huisken et al. Science)。この特徴により、従来の共焦点型顕微鏡等に比べて少ない照射光量で高速に、かつ深くまで観察することができ、特に発生の研究において有用である。この顕微鏡を開発者のグループとの共同研究により当研究室に導入し、マウス胚を培養可能な装置を組み込むことに成功した。この系を用いてマウス原腸陥入期胚の全胚ライブイメージングを行なった結果、6.5日とさらには5.5日胚のエピブラストにおいても核がエレベーター運動をしていることを明らかにした。核のエレベーターはapical-basal軸に添って核が上下運動をする現象でこれまでに神経上皮で起こることが知られている。核が移動する意義についてはまだ分かっておらず、今回の早い時期での発見がエレベーター運動の意義解明に一石を投じる可能性がある。さらに理化学研究所との共同研究により核を4次元的に追跡するソフトウェアを開発し中胚葉細胞を追跡した結果、これまで他種の研究から想定されていたような中胚葉細胞が集団として移動する形式ではなく、個々の細胞が独立して自由に動き回りつつも前方に向かって動く形式であることを明らかにした。