類器官とハイスループットスクリーニングシステムを用いたがん浸潤寄与因子の探索

使用类器官和高通量筛选系统寻找导致癌症侵袭的因素

• 批准号: 17K14997
• 负责人: 市川 壮彦
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Kanazawa Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2017
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2017-04-01 至 2019-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17K14997/
• 关键词: MDCK; シスト; 回転運動; 定量化; がん浸潤; 腫瘍生物学; 浸潤・転移; MDCKシスト; 回転運動定量化

がんは悪性化すると浸潤および転移をするが、生体内ではその過程を直接観察することが難しく、そのメカニズムや制御している因子については未だに明らかではない。近年、生体内の構造に類似した器官（類器官）を試験管内で作製する手法が開発され、より生体に近い環境でがん細胞の動態を観察することが可能になった。我々はMDCK細胞が3次元培養中で形成する類器官（シスト）をがん浸潤モデルとして用い、シストの回転運動に寄与する因子を明らかにすることによってがん浸潤因子候補を提供することを目標としている。昨年度は薬剤によるシスト回転運動を定量化するためのスクリーニングシステムの構築を行ったが、今年度は構築した系と阻害剤ライブラリを用いてMDCK細胞回転運動メカニズムの解明を行った。その結果、BlebbistatinやCytochalasin D、Nocodazoleと言った細胞骨格制御に関わる阻害剤が濃度依存的にMDCKシストの回転運動を阻害することを明確にした。さらに、PD0325901やU0126といったマイトジェン活性化細胞外シグナル関連キナーゼ阻害剤、GF 109203XやGo 6983といったプロテインキナーゼ阻害剤が回転運動を阻害することを明らかにし、Purvalanol AやCdk2/9 inhibitorといった細胞周期関連因子阻害剤の一部が回転運動を阻害することを示した。CDK及びCyclinのノックダウンを行ったところ、Cyclin B1がMDCKシストの回転運動に関わっていることを明らかにした。

The process of biological transformation is directly observed, and the process of biological transformation is controlled. In recent years, the structure of similar organs (organoids) in vivo has been tested for the development of methods for controlling the behavior of cells in the environment near the organism. The organoid formed by MDCK cells in three-dimensional culture can be used for infiltration and return movement. In the past year, the number of cells in the brain has increased significantly. The results showed that Blebbistatin, Cytochalasin D and Nocodazole were related to the inhibition of cytoskeleton in a concentration-dependent manner. In addition, PD0325901 and U0126 are used to activate the extracellular cycle related inhibitor, GF 109203X and Go 6983. Purvalanol A and Cdk2/9 inhibitor are used to inhibit cell cycle related factor inhibition. CDK and Cyclin B1 are related to the reverse movement of MDCK.

项目成果

MDCKシストにおける1細胞追跡方法の開発

MDCK囊肿单细胞追踪方法的发展

• 发表时间: 2017
• 作者: 森 勇伍;秋田 薫;中田 博;市川壮彦
• 通讯作者: 市川壮彦

ライトシート蛍光顕微鏡(LSFM)とLSFMを用いたマウス初期胚のライブイメージング

光片荧光显微镜 (LSFM) 和使用 LSFM 对早期小鼠胚胎进行实时成像

• 发表时间: 2018
• 作者: 河野晋;岡橋伸幸;松田史生;清水浩;髙橋智聡;市川壮彦
• 通讯作者: 市川壮彦

腸管オルガノイドを用いた腫瘍形成過程の観察

利用肠道类器官观察肿瘤形成过程

• 发表时间: 2017
• 作者: Murashima Akihiro;Shinjo Keiko;Katsushima Keisuke;Onuki Tetsuo;Kondoh Yasumitsu;Osada Hiroyuki;Kagaya Noritaka;Shin-ya Kazuo;Kimura Hiroshi;Yoshida Minoru;Murakami Shingo;Kondo Yutaka.;市川壮彦
• 通讯作者: 市川壮彦