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アポトーシス細胞のホスファチジルセリン露呈機構

凋亡细胞中磷脂酰丝氨酸暴露的机制

基本信息

批准号：
10J06329
负责人：
鈴木淳
金额：
$ 0.64万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2010
资助国家：
日本
起止时间：
2010 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10J06329/
关键词：
Phosphatidylserine Scramblase TMEM16F Scott症候群

项目摘要

アポトーシス細胞のホスファチジルセリン(PS)露呈機構を明らかにすることを目的として研究を進めた。アポトーシス時のPS露出にはカルシウムの上昇が必要なことから、カルシウムイオノフォアA23187を用いた実験系を構築し、その系において「細胞が生きたままPSを露出する」条件を見つけた。この特徴をいかして、A23187処理によりPSを強く露出した細胞をフローサイトメーターを用いてソーティングし、このA23187処理とソーティングの操作を19回繰り返すことで、PS露出に感受性のある細胞を樹立した。その細胞からcDNAライブラリーを作成し、親細胞に発現させPS露出に感受性を獲得させる遺伝子を探索したところ、8回膜貫通タンパク質のTMEM16Fを同定することができた。同定されたTMEM16Fは細胞内領域に変異が導入されており、その変異体を発現させると細胞が生きたままPSを露出した。野生型のTMEM16Fの発現はカルシウム刺激により対照よりも速やかにPSを露出した。PSを外側に露出する分子として、リン脂質を双方向に区別なく輸送するスクランブラーゼというタンパク質の存在が古くから仮定されていたが、TMEM16FはPSの露出だけでなく、通常は外側に存在するホスファチジルコリンの取り込みも促進することが分かった。以上より、TMEM16Fがスクランブラーゼそのもの、もしくはそのコンポーネントの一つであると結論した。また、血小板がPSを露出できないために血液凝固に異常をきたすスコット症候群の患者において、TMEM16Fを機能不全にさせる点変異があることを見つけた。

The purpose of this study is to investigate the role of the PS in the development of the disease. When PS is exposed, it is necessary to construct a system using A23187. The condition of "cell growth and PS exposure" is described. The characteristics of the A23187 process include: PS exposure; cell growth; and PS exposure. The expression of cDNA in the cell was detected by PCR, and the expression of TMEM 16F in the cell was detected by PCR. TMEM 16F is a new type of protein that is introduced into the intracellular domain. Wild type TMEM 16F appears in response to stimulation and PS exposure. PS is exposed to molecules and lipids in both directions, and the presence of PS in TMEM 16F is usually promoted by the presence of PS in the outside. In the above, TMEM16F is the only one who can be used to solve the problem. In patients with TMEM 16F dysfunction, there is an abnormality in blood coagulation due to platelet PS exposure.

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Methods of screening a blood coagulation modulator

筛选凝血调节剂的方法

DOI：
发表时间：
2010
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

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生命科学最新评论

DOI：
发表时间：
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

京都大学2010年度研究成果

京都大学2010年研究成果

DOI：
发表时间：
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

Calcium-dependent phospholipid scrambling by TMEM16F

DOI：
10.1038/nature09583
发表时间：
2010-12-09
期刊：
NATURE
影响因子：
64.8
作者：
Suzuki, Jun;Umeda, Masato;Nagata, Shigekazu
通讯作者：
Nagata, Shigekazu

DOI：
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通讯作者：
Takaaki Nara and Yuichiro Yaguchi