アポトーシス細胞のホスファチジルセリン露呈機構
凋亡细胞中磷脂酰丝氨酸暴露的机制
基本信息
- 批准号:10J06329
- 负责人:
- 金额:$ 0.64万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for JSPS Fellows
- 财政年份:2010
- 资助国家:日本
- 起止时间:2010 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
アポトーシス細胞のホスファチジルセリン(PS)露呈機構を明らかにすることを目的として研究を進めた。アポトーシス時のPS露出にはカルシウムの上昇が必要なことから、カルシウムイオノフォアA23187を用いた実験系を構築し、その系において「細胞が生きたままPSを露出する」条件を見つけた。この特徴をいかして、A23187処理によりPSを強く露出した細胞をフローサイトメーターを用いてソーティングし、このA23187処理とソーティングの操作を19回繰り返すことで、PS露出に感受性のある細胞を樹立した。その細胞からcDNAライブラリーを作成し、親細胞に発現させPS露出に感受性を獲得させる遺伝子を探索したところ、8回膜貫通タンパク質のTMEM16Fを同定することができた。同定されたTMEM16Fは細胞内領域に変異が導入されており、その変異体を発現させると細胞が生きたままPSを露出した。野生型のTMEM16Fの発現はカルシウム刺激により対照よりも速やかにPSを露出した。PSを外側に露出する分子として、リン脂質を双方向に区別なく輸送するスクランブラーゼというタンパク質の存在が古くから仮定されていたが、TMEM16FはPSの露出だけでなく、通常は外側に存在するホスファチジルコリンの取り込みも促進することが分かった。以上より、TMEM16Fがスクランブラーゼそのもの、もしくはそのコンポーネントの一つであると結論した。また、血小板がPSを露出できないために血液凝固に異常をきたすスコット症候群の患者において、TMEM16Fを機能不全にさせる点変異があることを見つけた。
ア ポ ト ー シ ス cells の ホ ス フ ァ チ ジ ル セ リ ン (PS) dew is institutional を Ming ら か に す る こ と を purpose と し を て research into め た. ア ポ ト ー シ ス の PS exposing に は カ ル シ ウ ム の rise が necessary な こ と か ら, カ ル シ ウ ム イ オ ノ フ ォ ア A23187 を with い た be 験 を build し, そ の is に お い て "cell が き た ま ま PS を reveal す る" conditions を see つ け た. こ の, 徴 を い か し て, A23187 処 Richard に よ り PS を く show strong し た cells を フ ロ ー サ イ ト メ ー タ ー を with い て ソ ー テ ィ ン グ し, こ の A23187 処 Richard と ソ ー テ ィ ン グ の を 19 back to operation Qiao り return す こ と で, PS show に susceptibility の あ を る cells establish し た. そ の cells か ら cDNA ラ イ ブ ラ リ ー を make し, parent cell に 発 now さ せ PS show に susceptibility を get さ せ る posthumous son 伝 を explore し た と こ ろ, 8 back transmembrane タ ン パ ク qualitative の TMEM16F を with fixed す る こ と が で き た. With fixed さ れ た TMEM16F に は cell field - different が import さ れ て お り, そ の - variant を 発 now さ せ る と cells born が き た ま ま PS を reveal し た. The wild-type <s:1> TMEM16F <s:1> shows カ カ シウム シウム stimulation によ against よ speed や に にPSを to reveal た. PS を lateral に reveal す る molecular と し て, リ ン lipid を both sides to に difference な く conveying す る ス ク ラ ン ブ ラ ー ゼ と い う タ ン パ ク qualitative の is が ancient く か ら 仮 set さ れ て い た が, TMEM16F は PS の reveal だ け で な く, usually は lateral に す る ホ ス フ ァ チ ジ ル コ リ ン の take り 込 み も promote す る こ と か が points Youdaoplaceholder0. The above よ り, TMEM16F が ス ク ラ ン ブ ラ ー ゼ そ の も の, も し く は そ の コ ン ポ ー ネ ン ト の a つ で あ る と conclusion し た. ま た, platelet が PS を reveal で き な い た め に abnormal clotting に を き た す ス コ ッ の ト syndrome patients に お い て, TMEM16F を insufficiency に さ せ る points - different が あ る こ と を see つ け た.
项目成果
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专著数量(0)
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Calcium-dependent phospholipid scrambling by TMEM16F
- DOI:10.1038/nature09583
- 发表时间:2010-12-09
- 期刊:
- 影响因子:64.8
- 作者:Suzuki, Jun;Umeda, Masato;Nagata, Shigekazu
- 通讯作者:Nagata, Shigekazu
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