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チロシンリン酸化酵素c-Ab1の機能解析

酪氨酸激酶c-Ab1的功能分析

基本信息

批准号：
06J08815
负责人：
鈴木淳
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Kyoto University (2007)Osaka University (2006)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06J08815/
关键词：
c-Ab1 Abi-1 Mena CHO細胞 actin c-Abl リン酸化 GFP GST セルソーター

项目摘要

我々はこれまで、精製タンパク質を用いてin vitroでリン酸化反応の再構築を行うことを考え、哺乳類細胞で、浮遊培養が可能なCHO-S細胞を用いたタンパク質発現システムを構築した。このシステムは、レトロウイルスレセプターを発現させたCHO-S細胞に、目的遺伝子を組み込んだレトロウイルスを感染させ、マーカーとして用いたGFP高発現細胞をセルソーターにより選択することで、目的タンパク質安定高発現細胞を迅速かつ簡便に取得できるのが特徴である。現在このシステムを用いて、c-Ab1、Abi-1、Menaが発現精製できることは確認済みである。Menaに関しては、更にゲルろ過、イオン交換カラムを組み合わせることで精製度を上げ、4量体として精製されることが分かった。この精製タンパク質を、YFP-actinを発現させた細胞にマイクロインジェクトしイメージングを行ったところ、actinが葉状仮足様の構造状の部位に集積したことから、機能タンパク質として精製されていることも確認できた。以上の結果より、新規「タンパク質発現系」を構築し、機能性タンパク質として大量精製できる基盤を作ったことより、申請内容の多くを達成できたと考える。

We have developed a new system for the purification of protein in vitro, and we have developed a new system for the purification of protein in vitro, and we have developed a new system for the purification of protein in vitro, and we have developed a new system for the purification of protein in vitro. These are the characteristics of CHO-S cells, target cells, and GFP high expression cells that can be quickly and easily obtained. Now, we can use C-Ab1, Abi-1 and Mena to refine the system. Mena is a professional, professional, and professional manufacturer. The purification and purification of YFP-actin are confirmed by the accumulation and purification of YFP-actin in the structural parts of the phyllodes. As a result of the above, the new "quality development system" is constructed, the functional quality is refined in large quantities, and the application content is achieved.

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

アダプタータンパク質を介したチロシンキナーゼc-Ablの活性制御

通过衔接蛋白调节酪氨酸激酶 c-Abl 活性

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
生化学 78巻6号
影响因子：
0
作者：
宍戸知行;鈴木淳;谷佳津子
通讯作者：
谷佳津子

NESH (Abi-3) is pre-sent in the Abi/WAVE complex but does not promote c-Abl-mediated phosphorylation

DOI：
10.1016/j.febslet.2006.10.065
发表时间：
2006-11-27
期刊：
FEBS LETTERS
影响因子：
3.5
作者：
Hirao, Noriko;Sato, Seiichi;Tani, Katsuko
通讯作者：
Tani, Katsuko

Regulation of cellular transformation by oncogenic and normal Ab1 kinases.

致癌和正常 Ab1 激酶对细胞转化的调节。

DOI：
发表时间：
2008
期刊：
Journal of biochemistry 141
影响因子：
0
作者：
Jun Suzuki;Tomoyuki Shishido
通讯作者：
Tomoyuki Shishido

アダプタータンパク質によるc-Ab1キナーゼの活性制御機構

衔接蛋白对 c-Ab1 激酶活性的调节

DOI：
发表时间：
2007
期刊：
影响因子：
0
作者：
Jun Suzuki;Tomoyuki Shishido;鈴木淳
通讯作者：
鈴木淳

A rapid protein expression and purification system using Chinese hamster ovary cells expressing retrovirus receptor.

使用表达逆转录病毒受体的中国仓鼠卵巢细胞的快速蛋白质表达和纯化系统。

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
Journal of Biotechnology 126
影响因子：
0
作者：
Suzuki;J.;Fukuda;M.;Kawata;S.;Maruoka;M.;Takeya;T.;Shishido T
通讯作者：
Shishido T

DOI：
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通讯作者：
Takaaki Nara and Yuichiro Yaguchi