抗体生産を目指した次世代型フィッシュモデルの創出

创建用于抗体生产的下一代鱼类模型

• 批准号: 21656215
• 负责人: 田丸 浩
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: Mie University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21656215/
• 关键词: 抗体生産; 金魚(水泡眼); ゼブラフィッシュ; 組換えタンパク質; サンドイッチ法; ドットブロット; 免疫グロブリン; ELISA法

本研究では、実験モデル動物として注目されている小型魚類のゼブラフィッシュ(Danio rerio)から次世代型モデルフィッシュとして注目した金魚(水泡眼)を用いた抗体生産系の創出を目指した。すなわち、既存の免疫哺乳動物(マウス、ウサギなど)では作製が困難な膜タンパク質に対する抗体を取得するためには、種が離れた魚類などの脊椎動物を用いることでその問題を克服できると考えた。そこで最終年度となる本年度は、金魚由来の免疫グロブリン重鎖(IgH)遺伝子のクローニングならびに塩基配列の決定を行った。さらに、水泡眼の腹腔内あるいは水泡内に抗原タンパク質(GFP-His)を直接またはアジュバンドとともに投与して追加免疫をした後、水泡内液を採取した。ポジティブコントロールとして市販の抗GFP抗体または抗Hisタグ抗体を用いたサンドイッチ法によるドットブロットを行うことで、抗原となるGFP-Hisに対する水泡液内の抗体を検出した。その結果、腹腔内へのGFP-Hisでは明らかな抗体生産の誘導が認められなかったが、アジュバンドとともにGFP-Hisを水泡内に投与した場合に強く抗体生産が誘導されることが判明した。

This study is aimed at creating an antibody production system for small fish (Danio rerio) and for sub-generation fish (Danio rerio). The problem of obtaining antibodies against existing immune mammals can be overcome. This year, the final year, the goldfish origin of immune re-lock (IgH) gene selection and selection of the base of the decision. In addition, the vesicle fluid is collected after the vesicle fluid is injected directly into the abdominal cavity of the vesicle. Anti-GFP antibodies in the market and anti-His antibodies in the blister fluid As a result, the induction of antibody production in the abdominal cavity was identified.

项目成果

魚類による抗体生産系の構築と創薬ターゲットへの応用

利用鱼类构建抗体生产系统及其在药物发现靶标中的应用

• 发表时间: 2009
• 期刊: ケミカルエンジニアリング 54
• 作者: 田丸浩

魚類によるバイオ医薬品の可能性と将来展望

鱼类生物制药的可能性和未来前景

• 发表时间: 2010
• 作者: 田丸浩;田丸 浩
• 通讯作者: 田丸 浩

ヒトGPCRに対する魚類抗体作製法の開発

开发一种生产针对人类 GPCR 的鱼类抗体的方法

• 发表时间: 2009
• 作者: 石川文啓;秋山真一;三宅英雄;田丸浩
• 通讯作者: 田丸浩