枯草菌への全ゲノム輸送機構解明とタンパク質ナノ輸送への発展

枯草芽孢杆菌全基因组转运机制的阐明和蛋白质纳米转运的开发

• 批准号: 21658035
• 负责人: 赤松 隆
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: Sojo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21658035/
• 关键词: 枯草菌; ゲノム; ナノ輸送; DNA; タンパク質

枯草菌形質転換で新規な性質を見いだしている:1)枯草菌全ゲノム二本鎖DNAの細胞内輸送;2)Bacillus halodurans菌DNAによる形質転換(DNA相同性が低い、組換わった長さ150kb以上)。この長い距離の組換え機構の解明を第一の目的とした。また、ナノ輸送解析を第二の目的とした。Bacillus halodurans菌DNAによる枯草菌形質転換が高頻度で生じる突然変異体を分離した。その遺伝子機能を解析するために、異種菌DNAを数百kb持つ枯草菌を供与DNA源として用いた形質転換体の解析を行い、ゲノムのほとんどが供与菌由来である株などを見出した。従って、組換えの様式は、相同的組換えではなく、相同的組み換えから複製を行う機構であることが強く示唆された。少なくとも2個の変異があり、一方は、D-ループ形成が促進されること、他方は、その後の複製に向かいやすいことが示唆された。LP形質転換に対するComFAやEcsBの役割を調べた。ComFAは、キネティックスと同時連鎖解析から単なるヘリカーゼではなく、その他の機能(例えば、ブラウン運動の歯止め)を行い、かつDNAを一方向に取り込む機能を持つと推定できた。EcsBは精製DNAによる形質転換に必須のタンパク質の輸送に直接的もしくは間接的に掛かり合っていることが示唆された。酵母と枯草菌とで生産量の異なるタンパク質をPAGEで確認した。そのタンパク質は、形質転換で輸送されるのではないかと示唆される結果が得られた。

The new characteristics of DNA transformation in Bacillus subtilis are as follows:1) DNA transformation in Bacillus halodurans (DNA identity is low, DNA transformation length is more than 150kb). The first goal of the long distance is to change the structure of the organization. The second purpose of the analysis is to analyze the transport of the goods. Bacillus halodurans DNA mutation occurs frequently, and mutants are isolated. Analysis of the function of the gene, the DNA of the heterologous bacteria, hundreds of kb, the DNA of the subtilis, the DNA source, the DNA source, the従って、组换えの様式は、相同的组换えではなく、相同的组み换えから复制を行う机构であることが强く示唆された。A small number of different, one side, D-1 formation and promotion, the other side, after the copy of the middle and middle ComFA and EcsB are the key components of LP quality control. ComFA is a genetic linkage between DNA and other functions (e.g., movement). EcsB is a DNA purification system that requires the transfer of DNA directly and indirectly. The difference in yield of yeast and subtilis was confirmed by PAGE. The result is that the quality of the product is different from that of the original product.

项目成果

Role of ComFA in controlling the DNA uptake rate during transformation of competent Bacillus subtilis.

• DOI: 10.1016/j.jbiosc.2011.02.006
• 发表时间: 2011-06
• 期刊: Journal of bioscience and bioengineering
• 影响因子: 2.8
• 作者: Masaomi Takeno;H. Taguchi;T. Akamatsu

ecsBのBacillus subtilis形質転換に対する掛かり合い

ecsB 参与枯草芽孢杆菌转化

• 发表时间: 2010
• 作者: 竹野正臣;田口久貴;赤松隆
• 通讯作者: 赤松隆

異種菌の無傷な未精製DNAによる枯草菌の形質転換:組み換えに関わるAddAとAddBの掛かり合い

用异源细菌的完整未纯化 DNA 转化枯草芽孢杆菌：参与重组的 AddA 和 AddB 之间的相互作用

• 发表时间: 2010
• 作者: M.Takeno;H.Taguchi;T.Akamatsu;赤松隆;赤松隆
• 通讯作者: 赤松隆

枯草菌への全ゲノム輸送機構解明:定量的組換えモデルのホットスポット

阐明枯草芽孢杆菌全基因组转运机制：定量重组模型热点

• 发表时间: 2010
• 作者: M.Takeno;H.Taguchi;T.Akamatsu;赤松隆
• 通讯作者: 赤松隆

枯草菌の形質転換:AddAとAddBは組み換えに必要である

枯草芽孢杆菌转化：重组需要AddA和AddB

• 发表时间: 2010
• 作者: M.Takeno;H.Taguchi;T.Akamatsu;赤松隆;赤松隆;赤松隆;赤松隆;赤松隆
• 通讯作者: 赤松隆