Ｔｈ２細胞におけるＢａｍ３２の発現及びＢａｍ３２依存性ＴＣＲ　ｓｉｇｎａｌの解析

Th2细胞中Bam32表达和Bam32依赖性TCR信号分析

• 批准号: 22591072
• 负责人: 宮地 理彦
• 金额: $ 2.08万
• 依托单位: Osaka Dental University (2012)Kansai Medical University (2010-2011)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010-10-20 至 2013-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22591072/
• 关键词: Th2; Th2細胞; Bam32; TCR

平成24年度はTh1/Th2細胞の純化手技を確立し，Bam32のWestern blotを行い年度末までにBam32 signal を解析する予定であった。NaiveT細胞からTh1/Th2細胞を誘導する方法は数種報告されているが，誘導後未刺激のまま純化する実験法は確立されていない。既知の報告を元にTh1/Th2細胞を誘導し，Chemokine受容体であるCCR5/CXCR3(Th1)やCCR4(Th2)の発現パターンを目安に純化を試みたが得られた細胞の誘導効率，誘導細胞のviabilityは以降の実験に用いるには低いものであり，NaiveT細胞分取の段階からの見直しが必要と考えられた。これまで，NaiveT細胞の分取の方法として簡便なものとしてはCD4及びCD45RA/CD45ROの発現を利用したものが頻用されてきたが，他の表面形質発現を利用した分取法も幾つか報告され，一部の手法はキットとして市販化もされている。NaiveT細胞採取法及び培養法・純化法の各段階で条件・方法を変えNaiveT細胞純化・培養Th1/Th2分化・Th1/Th2純化の全段階について手技・方法の改良を試みたが,以降の解析に用いられるだけの充分な生細胞数を各細胞集団において維持できなかったため，以降の段階に進む事が出来なかった。平成24年度中には達成されず延長を申請したが，結局，解決策を見出すことが出来なかった。

Pingcheng 24 "Th1/Th2" cell to improve the technology "confirmed", Bam32 "Western blot" at the end of the year "Bam32 signal" analysis "predetermined". There are several reports on the method of NaiveT cell targeting Th1/Th2 cell advertising. After the guidance, there is no stimulation to make sure that the health care system is established. Since it is known that the reporting system is Th1/Th2, and the Chemokine acceptor is CCR5/CXCR3 (Th1) CCR4 (Th2), it is necessary to determine the accuracy of the viability, and to determine the accuracy of the data, and the NaiveT cell should be divided into two segments. The NaiveT cells are divided into two parts: one is the method, the other is the CD4, the other is the CD45RA/CD45RO, the other is the use of the computer, the computer. The NaiveT cell culture method and the culture method were used to determine the condition of each segment, the NaiveT cell culture, the Th1/Th2 differentiation, the Th1/Th2 differentiation, the whole cell culture, the whole cell culture, the cell culture, the cell In the 24th year of Pingcheng, the presiding officer of Pingcheng has applied for an extension of the contract. At the end of the game, the resolution strategy has been issued and released.