鳥類の受精成立に関わるカルシウムオシレーションパターンと過剰の雄性前核形成

鸟类受精相关的钙振荡模式和过度雄性原核形成

• 批准号: 22780254
• 负责人: 水島 秀成
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Waseda University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 2011
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22780254/
• 关键词: IP_3受容体; ウズラ; カルシウム; PLCZ; 卵子活性化

脊椎動物の卵子は、精子の侵入後、細胞質内カルシウムの一過性の増加を引き起こすことで、活性化(卵子活性化)とその後の雌雄前核融合・胚発生を開始する。一方、鳥類では前核形成を誘起する物質として精子由来卵子活性化因子、フォスフォリパーゼCゼータ(phospholipase Czeta : PLCZ)が単離されているため、そのmRNAをウズラ未受精卵に顕微注入した。注入後20分にカルシウム増加反応が観察され、その後の前核形成が誘導された。イノシトール1,4,5三リン酸(IP_3)を注入した場合も、同様なカルシウム反応が起こった。対照的に、緩衝液を注入したウズラ卵子では、カルシウム増加反応は観察されなかった。またカルシウム反応が消失した時のIP_3受容体の発現解析を行った結果、緩衝液を注入したウズラ卵子では検出されたが、PLCZ mRNAまたはIP_3を注入した卵子では、そのバンドは検出されなかった。更にPLCZ-GFP融合タンパクを作製してPLCZの発現動向を観察したところ、カルシウム反応が消失した時に、前核へ移動し卵細胞質から消失した。これらのことから、精子由来PLCZによって誘起される卵細胞質内カルシウムの増加反応がトリガーとなって鳥類の卵子活性化が誘起されることが示唆された。またこのカルシウムは、IP_3受容体を介して放出された小胞体に由来するものであり、その放出は、IP_3受容体の発現レベルによって調節されている可能性が考えられる。

Vertebrate は の eggs, sperm の after the invasion, the cytoplasm カ ル シ ウ ム の transient の rights and an を lead き こ す こ と で, reactive activation (eggs) と そ の の male and female first nuclear fusion, embryo 発 を start す る. Party, birds で は pronucleus formation を induced す る material と し て sperm origin eggs activation factor, フ ォ ス フ ォ リ パ ー ゼ C ゼ ー タ (phospholipase Czeta: PLCZ) が 単 from さ れ て い る た め, そ の mRNA を ウ ズ ラ unfertilized egg に 顕 micro injection し た. Twenty minutes after injection, にカ シウム シウム increased anti応 が観 examination され and そ <s:1> followed by the formation of the anterior nucleus of the nucleus が induced された. <s:1> ノシト ノシト ノシト <s:1> リ 1,4,5 tris リ <e:1> acid (IP ₃)を is injected into the <s:1> た situation った, and the same なカ シウム シウム シウム シウム is used in reverse 応が to form 応が った. Polices according に, buffer を injection し た ウ ズ ラ eggs で は, カ ル シ ウ ム rights and against 応 は 観 examine さ れ な か っ た. ま た カ ル シ ウ ム anti 応 が disappear し た when の IP_3 by let body の 発 now line analytical を っ た results, buffer を injection し た ウ ズ ラ eggs で は 検 out さ れ た が, PLCZ mRNA ま た は IP_3 を injection し た eggs で は, そ の バ ン ド は 検 out さ れ な か っ た. More に PLCZ - GFP fusion タ ン パ ク を cropping し て PLCZ の 発 now moves を 観 examine し た と こ ろ, カ ル シ ウ ム anti 応 が disappear し た に, the former nuclear へ mobile し egg mass か ら disappear し た. こ れ ら の こ と か ら, sperm origin PLCZ に よ っ て induced さ れ る inside the egg mass カ ル シ ウ ム の rights and against 応 が ト リ ガ ー と な っ て の birds eggs activation が induced さ れ る こ と が in stopping さ れ た. ま た こ の カ ル シ ウ ム は を interface and IP_3 let body し て release さ れ た small cell body に origin す る も の で あ り, そ の release は, IP_3 let body の 発 now レ ベ ル に よ っ て adjust さ れ て い る possibility が exam え ら れ る.

项目成果

Novel method of gene transfer in birds : Intracytoplasmic sperm injection (ICSI) for green fluorescent protein (GFP) expression in quail blastoderms.

鸟类基因转移的新方法：胞浆内单精子注射（ICSI）用于鹌鹑胚盘中绿色荧光蛋白（GFP）的表达。

• 发表时间: 2010
• 期刊: Biology of Reproduction 83(6)
• 作者: Mizushima S;Mizushima S;Takagi S;Ono T;Shimada K.
• 通讯作者: Shimada K.

鳥類卵子活性化に対する卵細胞質内Ca2+とIP3受容体の役割

胞浆内 Ca2+ 和 IP3 受体对禽卵母细胞活化的作用

• 发表时间: 2011
• 作者: Rodler;D.;M.Serizawa;K.Kitaguchi;M.Kinoshita;T.Sato;G.Hiyama;笹浪知宏;水島秀成
• 通讯作者: 水島秀成

ニホンウズラにおける予想ユビキチン活性化酵素1のクローニング

日本鹌鹑中预测的泛素激活酶 1 的克隆

• 发表时间: 2011
• 作者: Yamashita;et al;神作宜男
• 通讯作者: 神作宜男

Down-regulation of inositol 1,4,5-trisphosphate receptor type 1(IP3R-1)for oocyte activation in quail

下调肌醇 1,4,5-三磷酸受体 1 型 (IP3R-1) 促进鹌鹑卵母细胞活化

• 发表时间: 2011
• 作者: Mizushima S;Ono T;Shimada K;他3名;5番目
• 通讯作者: 5番目

鳥類卵の受精の仕組み

鸟蛋的受精机制

• 发表时间: 2011
• 期刊: 比較内分泌学
• 作者: Yamashita Y;Okamoto M;Kawashima I;Nishmura R;Gunji Y;Hishinuma M;Shimada M;水島秀成
• 通讯作者: 水島秀成