鳥類の受精成立に関わるカルシウムオシレーションパターンと過剰の雄性前核形成

鸟类受精相关的钙振荡模式和过度雄性原核形成

• 批准号: 22780254
• 负责人: 水島 秀成
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Waseda University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 2011
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22780254/
• 关键词: IP_3受容体; ウズラ; カルシウム; PLCZ; 卵子活性化

脊椎動物の卵子は、精子の侵入後、細胞質内カルシウムの一過性の増加を引き起こすことで、活性化(卵子活性化)とその後の雌雄前核融合・胚発生を開始する。一方、鳥類では前核形成を誘起する物質として精子由来卵子活性化因子、フォスフォリパーゼCゼータ(phospholipase Czeta : PLCZ)が単離されているため、そのmRNAをウズラ未受精卵に顕微注入した。注入後20分にカルシウム増加反応が観察され、その後の前核形成が誘導された。イノシトール1,4,5三リン酸(IP_3)を注入した場合も、同様なカルシウム反応が起こった。対照的に、緩衝液を注入したウズラ卵子では、カルシウム増加反応は観察されなかった。またカルシウム反応が消失した時のIP_3受容体の発現解析を行った結果、緩衝液を注入したウズラ卵子では検出されたが、PLCZ mRNAまたはIP_3を注入した卵子では、そのバンドは検出されなかった。更にPLCZ-GFP融合タンパクを作製してPLCZの発現動向を観察したところ、カルシウム反応が消失した時に、前核へ移動し卵細胞質から消失した。これらのことから、精子由来PLCZによって誘起される卵細胞質内カルシウムの増加反応がトリガーとなって鳥類の卵子活性化が誘起されることが示唆された。またこのカルシウムは、IP_3受容体を介して放出された小胞体に由来するものであり、その放出は、IP_3受容体の発現レベルによって調節されている可能性が考えられる。

After the spinal animals invade the egg, the sperm invade, the female and male anterior nucleus fusion embryos begin to develop as soon as they are induced by sexual stimulation and activation (egg activation). On the one hand, the anterior nucleus of the animal is formed, and the sperm is derived from the egg activation factor, the egg activation factor (phospholipase Czeta: PLCZ) is isolated, and the unfertilized egg is microinjected into the unfertilized egg. 20 minutes after injection, anti-imaging was added, and the anterior nucleus was formed after injection. One hundred and fifty-five trichloroacetic acid (IP_3) was injected into the body of the baby, and the mixture was injected into the plant. The liquid is injected into the egg, the egg and the egg. When the IP _ 3 acceptor disappeared, the result of the analysis, the injection of the liquid into the egg, the injection of the IP _ 3 into the ovum, the injection of the IP _ 3 into the ovum, and the activation of the IP _ 3 receptor were detected. Change the PLCZ-GFP fusion protocol, observe the activity of the PLCZ, reverse the disappearance of the cell cycle, and transfer the pronucleus to the oocyte. The cause of the disease, the origin of the sperm, the activation of the egg, the activation of the egg. The reason for the formation of small cell bodies is that the IP_3 receptor is released, the IP_3 receptor is released, and the possibility is tested.

项目成果

Novel method of gene transfer in birds : Intracytoplasmic sperm injection (ICSI) for green fluorescent protein (GFP) expression in quail blastoderms.

鸟类基因转移的新方法：胞浆内单精子注射（ICSI）用于鹌鹑胚盘中绿色荧光蛋白（GFP）的表达。

• 发表时间: 2010
• 期刊: Biology of Reproduction 83(6)
• 作者: Mizushima S;Mizushima S;Takagi S;Ono T;Shimada K.
• 通讯作者: Shimada K.

鳥類卵子活性化に対する卵細胞質内Ca2+とIP3受容体の役割

胞浆内 Ca2+ 和 IP3 受体对禽卵母细胞活化的作用

• 发表时间: 2011
• 作者: Rodler;D.;M.Serizawa;K.Kitaguchi;M.Kinoshita;T.Sato;G.Hiyama;笹浪知宏;水島秀成
• 通讯作者: 水島秀成

ニホンウズラにおける予想ユビキチン活性化酵素1のクローニング

日本鹌鹑中预测的泛素激活酶 1 的克隆

• 发表时间: 2011
• 作者: Yamashita;et al;神作宜男
• 通讯作者: 神作宜男

Down-regulation of inositol 1,4,5-trisphosphate receptor type 1(IP3R-1)for oocyte activation in quail

下调肌醇 1,4,5-三磷酸受体 1 型 (IP3R-1) 促进鹌鹑卵母细胞活化

• 发表时间: 2011
• 作者: Mizushima S;Ono T;Shimada K;他3名;5番目
• 通讯作者: 5番目

鳥類卵の受精の仕組み

鸟蛋的受精机制

• 发表时间: 2011
• 期刊: 比較内分泌学
• 作者: Yamashita Y;Okamoto M;Kawashima I;Nishmura R;Gunji Y;Hishinuma M;Shimada M;水島秀成
• 通讯作者: 水島秀成