タミフル固定担体を用いた生化学的手法による生体内におけるタミフルの作用点の探索

使用达菲固定化载体，通过生化方法寻找达菲体内的作用位点

• 批准号: 22790098
• 负责人: 越後 典子
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Tokushima Bunri University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 2011
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22790098/
• 关键词: 薬学; タンパク質; プロテオーム; 脳・神経; タミフル; オセルタミビル; 副作用

オセルタミビル(タミフル[○!R])は、インフルエンザA型およびB型ウイルスのノイラミニダーゼを阻害し、インフルエンザウイルスの増殖を抑制する。タミフルは数少ないインフルエンザウイルス特効薬の一つであり、その社会的重要性は非常に高い。しかし近年、日本を中心として、タミフルを服用した若年の患者に異常行動が報告されており、若年選択的な副作用の可能性が指摘されるようになった。タミフルと異常行動の因果関係は今のところ明らかになっていないが、私たちはもしタミフルの服用と異常行動に因果関係があるのなら、脳にタミフルと結合するタンパク質が存在するはずであると考えた。そこで、タミフルを固定した担体を有機化学的に作製し、アフィニティクロマトグラフィーにより、生化学的および遺伝子工学的にタミフルと親和性のあるタンパク質を探索した。生体内からタミフルと親和性のあるタンパク質を単離するために、2つの方法でアプローチした。1)まず、分画したマウスの大脳抽出液からアフィニティクロマトグラフィーによりタミフル結合タンパク質を単離した。その結果、タミフルに親和性のあるタンパク質を検出することができ、質量分析により数種類の候補タンパク質を同定した。2)また、発現量の少ないタンパク質を検出するため、ヒト脳cDNAライブラリーを用いたファージディスプレイ法を併用した。タミフル結合アッセイを数回繰り返し、タミフルと親和性のあるファージを増幅したところ、約200個のプラークを得ることができた。それらのファージの遺伝子配列をBLAST検索し、タミフルと親和性のあるタンパク質の候補を得た。今後はこれらの候補タンパク質の機能にタミフルが影響するかどうかを解析し、タミフルの安全使用につなげたいと考えている。

オセルタミビル(タミフル[○!R])は、インフルエンザA type およびB type ウイルスのノイラミニダーゼを hinders し, インフルエンザウイルスの multiplying を inhibits する. The special effects of タミフルは are few, the importance of society is very high. In recent years, there have been abnormal behaviors among patients who have been taking the Japanese を Center として and タミフルを taking した如年がreport されており, if the possibility of side effects of wakanen selected なのrefute されるようになった.タミフルとAbnormal action のcausal relationship はNow のところ明らかになっていないが、private たちはもしタミフルの taking とAbnormal action, cause and effect, connection, quality, existence, and existence.そこで, タミフルをfixed したsupport をorganic chemistry に Manufacturing し, アフィニティクロマトグラフィーにより, biochemistry's および伝子子 Engineering's にタミフルと compatibility and quality した. In vivo affinity and affinity of the body, the quality of the material, and the method of 2つのmethod. 1) まず、　　　ロマトグラフィーによりタミフル combined with タンパク性を単里した.そのRESULT, タミフルにaffinityのあるタンパク性を検出することができ、Quality analysis によりNumber of types of candidates タンパクquality を同定した. 2) また、発综合の小ないタンパク性を検出するため、ヒト脳c DNA ライブラリーを用いたファージディスプレイ法を与した.タミフル combines アッセイをseveral times to return し, タミフルとaffinity のあるファThere are したところ and about 200 のプラークを得ることができた. The それらのファージの缝子matching をBLAST検SOし, the タミフルとaffinity のあるタンパク性の candidate をget た. In the future, the quality and function of the candidate material will be affected by the function of the material.うかをanalyticsし、タミフルのSafe useにつなげたいと考えている.

项目成果

オセルタミビル固定担体を用いた脳におけるオセルタミビル結合タンパク質の探索

使用奥司他韦固定载体在大脑中寻找奥司他韦结合蛋白

• 发表时间: 2011
• 作者: 山口幸恵;田島茂;小滝徹;澤辺京子;渡邉治雄;高崎智彦;倉根一郎;畠山大,岩井佑磨,村上宏起,五味康行,奥谷武史,橋本敏弘,浅川義範,奥野良信,石川豊数,越後典子,葛原隆;畠山大,岩井佑磨,村上宏起,五味康行,奥谷武史,橋本敏弘,浅川義範,奥野良信,石川豊数,越後典子,葛原隆;越後典子,正木智久,力武舞,磯田裕美子,木村康明,金井求,柴崎正勝,葛原隆
• 通讯作者: 越後典子,正木智久,力武舞,磯田裕美子,木村康明,金井求,柴崎正勝,葛原隆

Apoptosis of Human Lung Cancer Cells by Curcumin Mediated through Up-Regulation of "Growth Arrest and DNA Damage Inducible Genes 45 and 153"

• DOI: 10.1248/bpb.33.1291
• 发表时间: 2010-08-01
• 期刊: BIOLOGICAL & PHARMACEUTICAL BULLETIN
• 影响因子: 2
• 作者: Saha, Achinto;Kuzuhara, Takashi;Fujiki, Hirota
• 通讯作者: Fujiki, Hirota

タミフル固定担体を用いた脳におけるタミフル結合タンパク質の探索

使用达菲固定载体在大脑中搜索达菲结合蛋白

• 发表时间: 2012
• 作者: 磯田裕美子;正木智久;力武舞;日浅未来;越後典子;木村康明;金井求;柴崎正勝;葛原隆
• 通讯作者: 葛原隆