大腸がんにおける遺伝子発現異常の分子機構と意義

结直肠癌基因异常表达的分子机制及意义

• 批准号: 22700874
• 负责人: 西村 教子
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 2011
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22700874/
• 关键词: EHF; p53; 大腸がん

我々はこれまでに、細胞のがん化に伴い遺伝子発現パターンに劇的な変化が生じる機構と意義を解析し、ヒト大腸癌細胞はEHFを高発現することにより、p53依存性のアポトーシスを回避していることを見出した。本研究では、EHFが大腸癌で高発現する分子機構、p53の機能を抑制する分子機構を明らかにすることを目的としている。まず、EHFの発現を制御する因子を探索するために、転写因子を中心としたRNAiライブラリーを用いて、網羅的なRNAiスクリーニングを行った。結果、大腸がん細胞において、転写因子であるFOSL1やヒストンメチル化に関与するMLL2やASH2LなどがEHFの発現を制御していることが明らかとなった。さらに、ChIP法を用いて、EHFプロモーターへの直接結合を確認したところ、FOSL1がEHFのプロモーター上に直接結合していることが明らかとなった。今後、MLL2とASH2LのEHFプロモーターへの結合をそれぞれ確認すると共に、ヒストンメチル化によるEHFの発現制御機構の解明を行いたいと考えている。次に、EHFの発現抑制によるアポトーシス誘導機構の解明を行うために、p53発現について検討したところ、EHFの発現抑制によってp53タンパク質が安定化することが明らかとなった。さらに、EHFの発現を抑制することによってMDM2の発現量が減少すること、EHFを強制発現するとMDM2の発現量が劇的に増加することが明らかとなった。このとき、EHFの発現抑制、及び強制発現によって、MDM2のmRNAレベルは変化しないことが明らかとなった。これまでの研究により、MDM2はユビキチンライゲースであり、p53タンパク質の安定化に寄与していることが明らかとなっている。そこで我々は、EHFはMDM2を介してp53タンパク質の安定化に寄与し、大腸がん細胞におけるアポトーシスの制御を行っていると考え、EHFとMDM2の免疫沈降実験を行った。その結果、EHFとMDM2は直接結合することが明らかとなった。今後は、EHFによるMDM2タンパク質の安定化機構の解明を行うことにより、EHFがp53の機能を抑制する分子機構を明らかにする。

The mechanism of EHF development in colorectal cancer cells is analyzed. The mechanism of EHF development in colorectal cancer cells is analyzed. The mechanism of EHF development in colorectal cancer cells is analyzed. The aim of this study is to clarify the molecular mechanisms that inhibit the function of p53 in colorectal cancer. The EHF gene expression factor is explored in this paper. The results showed that FOSL1 and ASH2L could inhibit the development of EHF. In addition, ChIP method is used to confirm the direct combination of EHF and FOSL1. In the future, MLL2 and ASH2L's EHF development control mechanism will be clarified. Second, EHF occurrence inhibition, p53 occurrence inhibition, p53 occurrence inhibition. In addition, the occurrence of EHF is suppressed, and the occurrence of MDM2 is reduced. In addition, the occurrence of EHF is stressed, and the occurrence of MDM2 is greatly increased. EHF gene expression inhibition, stress gene expression inhibition, MDM2 gene expression inhibition The research results show that the MDM2 has a high quality and stable stability. EHF and MDM2 are involved in the regulation of immune sedimentation in large intestine cells. The result is that EHF and MDM2 are directly combined. In the future, the molecular mechanism of MDM2 in EHF will be clarified.

项目成果

Activity-dependent ubiquitination of the AMPA receptor subunit GluA2.

• DOI: 10.1523/jneurosci.5944-10.2011
• 发表时间: 2011-02-23
• 期刊: The Journal of neuroscience : the official journal of the Society for Neuroscience
• 作者: Lussier MP;Nasu-Nishimura Y;Roche KW
• 通讯作者: Roche KW