癌のワールブルグ効果に関連するスプライシング異常の意義と機序

癌症中与瓦尔堡效应相关的剪接异常的意义和机制

• 批准号: 22700893
• 负责人: 田沼 延公
• 金额: $ 1.75万
• 依托单位: Miyagi Cancer Center Research Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22700893/
• 关键词: スプライシング; 解糖系; がん; ワールブルグ効果; PKM; 代謝

腫瘍細胞における嫌気的解糖系の構成的異常亢進(ワールブルグ効果)と関連する、解糖系酵素ピルビン酸キナーゼM(PKM)遺伝子スプライシング異常の意義と分子機構を明らかにすることを目的として、独自のシステム開発に取り組んだ;「1」“本来PKMのスプライシングが変換する場面(細胞の分化やがん化等)においても、一定のスプライシングアイソフォーム(M1またはM2)が発現され続ける”マウス(M1/M2-ノックイン(KI)マウス)の作製に取り組んだ。M1-KIマウスに関しては、相同組み換えES細胞樹立、キメラマウス作製、ヘテロM1-KIマウス作出までを完了し、さらにホモKIマウスの作製やBL6バックグラウンドへの戻し交配に取り掛かった。M2-KIに関しては、ターゲティングベクター(TV)作製が完了し、ES細胞への導入を行い、現在、相同組み換え体のスクリーニングを行っている。「2」レポーター遺伝子由来の蛍光タンパク(EGFP・DsRed)発現によってPKMスプライシングパターンをモニターできるマウスの作製に取り組んだ。トランスジェニックマウス作製においては、BAC-Tgembed法を採用することとし、レポーター遺伝子の基本カセットのBACクローンへの埋め込みが完了した。これら取組みにより、スプライシング異常・ワールブルグ効果を標的とした新規がん治療・診断・予防開発に向け、次年度以降の研究展開に重要な独自システムの開発が大きく前進した。

我们已经从事自己的系统开发工作，目的是阐明糖酵解酶丙酮酸激酶M（PKM）基因剪接异常与肿瘤细胞中与厌氧性糖酵解效应（WARBURG效应）的本构异常相关的显着性和分子机制； “ 1”我们已经从事小鼠（M1/M2-KNOCK-IN（KI）小鼠的创建，其中某些剪接同工型（M1或M2）即使在最初转化PKM剪接（细胞分化，癌症等）的情况下，也会不断表达。关于M1-KI小鼠，我们完成了同源重组ES细胞的建立，嵌合小鼠的产生和异质1-KI小鼠的产生，并开始致力于创建HOMOKI小鼠并将其反向交叉至BL6背景。关于M2-KI，靶向矢量（TV）制备已经完成，并且已引入ES细胞，目前正在筛选同源重组者。我们研究了可以通过表达源自“ 2”报告基因的荧光蛋白（EGFP ・ dsred）来监测PKM剪接模式的小鼠。在转基因小鼠的产生中，采用了BAC-TGEMBED方法，并完成了记者基因的基本盒式盒子中的BAC克隆。这些努力导致了独特系统发展的重大进步，这对于下一个财政年度及以后的研究开发至关重要，旨在开发新的癌症治疗，诊断和预防目标，以防止剪接异常和Warburg效应。

项目成果

Development of mouse brain tumor models derived from neural stem cells

开发源自神经干细胞的小鼠脑肿瘤模型

• 发表时间: 2011
• 作者: 西村孝司、脇田大功;他;大西伸幸
• 通讯作者: 大西伸幸

リン酸化によるスプライシング装置タンパクSap155/Sf3b1制御機構

通过磷酸化调节剪接装置蛋白 Sap155/Sf3b1

• 发表时间: 2012
• 作者: Miyuki Nomura;Kenichi Shiiba;Nobuhiro Tanuma;田沼延公
• 通讯作者: 田沼延公

総説:PKMスイッチと発がん

评论：PKM 开关和致癌作用

• 发表时间: 2012
• 期刊: 実験医学増刊「がんと代謝」
• 作者: Takahashi D;Azuma H;Sakai H;Sou K;Wakita D;Abe H;Fujihara N;Horinouchi H;Nishimura T;Kobayashi K;Ikeda H.;田沼延公
• 通讯作者: 田沼延公

Switch of pyruvate kinase M (PKM) isoforms in human breast cancers

人类乳腺癌中丙酮酸激酶 M (PKM) 亚型的转换

• 发表时间: 2011
• 作者: Kodera;Y.;Katanasaka;Y.;Kitamura;Y.;Hitoshi;T.;Nishio;K.;Tamura;T.;Koizumi;F;田沼延公
• 通讯作者: 田沼延公

グリオーマにおけるピルビン酸キナーゼM(PKM)スプライシングのスイッチ機構

胶质瘤中丙酮酸激酶 M (PKM) 剪接的转换机制

• 发表时间: 2011
• 作者: Ueki M;Kawasaki Y;平塚正治;Shima H;Ueki M.;島礼;島礼
• 通讯作者: 島礼