Funktion der SNARE-Proteine mUSE1 und mSEC20 sowie von mTIP-20 beim Golgi-ER-Transport in Säugerzellen

SNARE 蛋白 mUSE1 和 mSEC20 以及 mTIP-20 在哺乳动物细胞高尔基体-内质网转运中的功能

基本信息

项目摘要

Das Säuger-Ortholog (mUSE1) des von G. Fischer von Mollard unlängst gefundenen SNARE-Proteins USE1 aus S.cerevisiae (Manuskript in Vorbereitung) konnte von uns in das endoplasmatische Retikulum (ER) lokalisiert werden. Im Rahmen des Projekts soll untersucht werden, ob mUSE1 am retrograden Golgi-ER-Transport beteiligt ist und ob es dabei zu Interaktionen nicht nur mit mSEC22b und Syntaxin 18, sondern auch mit bei uns in Klonierung begriffenen Säuger-Orthologen der Hefeproteine Sec 20 und TIP20 kommt. Im Rahmen dieses Projekts soll nicht nur die Rolle dieser Proteine am Docking/Fusions-Prozess, sondern auch deren mögliche Beteiligung am Cargo-Sorting und/oder Budding im cisGolgi untersucht werden. Protein-Interaktionen sollen sowohl biochemisch, als auch durch FRET-Messungen an lebenden Zellen untersucht werden. Durch gezieltes knock-down von mUSE1 und mSEC20 (si-RNA Technik, direkt oder über pSUPER-Vektor) und Mikroinjektion von funktionellen Antikörpern-Fab-Fragmenten sollen weitere Einsichten in die Funktion der Proteine gewonnen werden.
Das Säuger-Ortholog (mUSE1) des von G. Fischer von Mollard unlängst gefundenen SNARE-Proteins USE1 aus S.cerevisiae (Manuskript in Vorbereitung) konnte von uns in das endplasmatische Retikulum (ER) lokalisiert werden。 Im Rahmen des Projekts soll untersucht werden, ob mUSE1 am Retrograden Golgi-ER-Transport beteiligt ist und ob es dabei zu Interaktionen nicht nur mit mSEC22b und Syntaxin 18, sondern auch mit bei uns in Klonierung begriffenen Säuger-Orthologen der Hefe Proteine Sec 20和 TIP20 科姆特。我的 Rahmen 项目是在 Docking/Fusions-Prozess 上的蛋白质项目,它是货物分拣和/或在高尔基体中萌芽的项目。蛋白质相互作用所涉及的生物化学,也与 FRET-Messungen 和 Zellen 的实验有关。通过 mUSE1 和 mSEC20(si-RNA 技术,直接或 pSUPER-Vektor)的敲除和功能性微注射,Antikörpern-Fab-Fragmenten 解决了蛋白质功能中的问题。

项目成果

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