Enzymatic synthesis of chondroitin sulfate high-sulfated active domains and elucidation of the biological functions

硫酸软骨素高硫酸化活性结构域的酶法合成及其生物学功能的阐明

• 批准号: 23570176
• 负责人: SUGIURA Nobuo
• 金额: $ 3.41万
• 依托单位: Aichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2013
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-23570176/
• 关键词: 糖鎖生物学; グリコサミノグリカン; コンドロイチン硫酸; 酵素合成; 硫酸転移酵素; ELISA; 表面プラズモン測定; コンドロイチナーゼ; 硫酸基転移酵素; 表面プラズモン測定法; バキュロウイルス; カイコ; コンドロイチンポリメラーゼ; 高硫酸化活性ドメイン

A large variety of artificial chondroitin sulfate (CS) chains with various molecular sizes, sulfation positions and sulfation ratios was synthesized with chondroitin polymerase from E. coli strain K4 (K4CP) and some kinds of sulfotransferases, and a high sulfated CS library was constructed with defined structures. Affinity of CS-binding physiological active molecules was investigated using the biotin-labeled CS library by ELISA and Biacore assay. A novel chondroitinase (ODV-E66) from insect-pathogenic baculovirus was found, and CS in tissues of silkworm that is host of baculovirus BmNPV was shown by biochemical and histochemical analyses. Presence of CS in peritrophic membrane protecting the midgut epithelium of the insect was especially suggested that ODV-E66 facilitates the primary infection of the virus by digesting of the CS.

利用大肠杆菌的软骨素聚合酶合成了多种分子大小、硫酸化位置和硫酸化比例不同的人工硫酸软骨素链。coli K4（K4 CP）和几种硫基转移酶的同源性进行比较，构建了一个结构明确的高硫酸化CS文库。利用生物素标记的CS文库，通过ELISA和Biacore分析来研究CS结合生理活性分子的亲和力。从昆虫病原性杆状病毒中发现一种新的软骨素酶（ODV-E66），并通过生化和组织化学分析，证实了BmNPV在家蚕组织中存在软骨素酶。CS存在于保护昆虫中肠上皮的围食膜中，特别是表明ODV-E66通过消化CS促进病毒的初次感染。

项目成果

A novel chondroitinase obtained from baculovirus

从杆状病毒中获得的新型软骨素酶

• 发表时间: 2011
• 作者: Oshima;Y.;Kinouchi;K.;Ichihara;A.;Sakoda;M.;Kurauchi-Mito;A.;Bokuda;K.;Narita;T.;Kurosawa;H.;Sun-Wada;G. H.;Wada;Y.;Yamada;T.;Takemoto;M.;Saleem;M. A.;Quaggin;S. E.;Itoh;H. J .;杉浦信夫,瀬戸山由佳,千葉美恵,木全弘治,渡辺秀人
• 通讯作者: 杉浦信夫,瀬戸山由佳,千葉美恵,木全弘治,渡辺秀人

高硫酸化コンドロイチン硫酸の酵素合成と低硫酸単位を切断する新奇コンドロイチナーゼ

高硫酸化硫酸软骨素的酶法合成和切割低硫酸单元的新型软骨素酶

• 发表时间: 2011
• 作者: Sun-Wada;G. H.;Tabata;H.;Kuhara;M.;Kitahara;I.;Takashima;Y.;and Wada;Y.;杉浦信夫,塩入達政,伊藤浩美,佐藤隆,千葉美恵,瀬戸山由佳,成松久,木全弘治,渡辺秀人
• 通讯作者: 杉浦信夫,塩入達政,伊藤浩美,佐藤隆,千葉美恵,瀬戸山由佳,成松久,木全弘治,渡辺秀人

コンドロイチン分解用またはコンドロイチン硫酸分解用の酵素、試薬、分解方法、高硫酸化オリゴ糖の製造方法、ならびに粗製物

酶、试剂、分解方法、高硫酸化低聚糖的制造方法以及软骨素分解或硫酸软骨素分解用粗产物

• 发表时间: 2012

組換え酵素による人工コンドロイチン硫酸ライブラリーの作成と生理機能の検討

利用重组酶构建人工硫酸软骨素文库并研究其生理功能

• 发表时间: 2013
• 作者: Wada Y.;Sun-Wada GH.;塩入達政,渡辺秀人,杉浦信夫
• 通讯作者: 塩入達政,渡辺秀人,杉浦信夫

囲食膜のコンドロイチン硫酸とバキュロウイルスのコンドロイチン分解酵素

周细胞中的硫酸软骨素和杆状病毒中的软骨素降解酶

• DOI: 10.11416/konchubiotec.82.2_109
• 发表时间: 2013
• 期刊: Sanshi-Konchu Biotec
• 作者: 大壁和輝;反田宗良;合田光寛;大塚正人;杉浦信夫
• 通讯作者: 杉浦信夫