Role of recombinant nicked beta2-glycoprotein I domain V in angiogenesis
重组切口β2-糖蛋白I结构域V在血管生成中的作用
基本信息
- 批准号:23591431
- 负责人:
- 金额:$ 3.24万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
- 财政年份:2011
- 资助国家:日本
- 起止时间:2011 至 2013
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
Previously we reported nicked beta2-glycoprotein I (b2GPI) binds to angiostatin via its domain V and exerts pro-angiogenic effect (Nakagawa et al. Blood 2009). The aim of this study was to investigate the role of b2GPI domain V in angiogenesis. Recombinant b2GPI domain V was generated in mammalian cell expression system and bacteria. Purification of the product was done using anti-FLAG column or nickel column. Binding between intact/nicked b2GPI domain V and angiostatin 4.5 (AS4.5) was evaluated using surface plasmon resonance. Nicked b2GPI domain V specifically bound onto AS4.5 at KD of ~ 5 x 10-8M, whereas intact b2GPI domain V showed no specific binding. Cell proliferation assay using human umbilical endothelial cells (HUVECs) were performed in the presence or absence of intact/nicked b2GPI domain V. Both intact and nicked b2GPI domain V slightly inhibited cell proliferation at 0.4uM.In conclusion, nicked b2GPI domain V bound to AS4.5, as observed in nicked form of whole b2GPI.
先前我们报道了缺口β -糖蛋白I (b2GPI)通过其结构域V与血管抑制素结合并发挥促血管生成作用(Nakagawa等)。血2009)。本研究旨在探讨b2GPI结构域V在血管生成中的作用。重组b2GPI结构域V在哺乳动物细胞表达系统和细菌中生成。采用反flag柱或镍柱对产物进行纯化。利用表面等离子体共振评估完整/缺口b2GPI结构域V与血管抑制素4.5 (AS4.5)之间的结合。缺失的b2GPI结构域V在KD为~ 5 × 10-8M时特异性结合到AS4.5上,而完整的b2GPI结构域V没有特异性结合。使用人脐带内皮细胞(HUVECs)进行细胞增殖实验,在存在或不存在完整的/缺口的b2GPI结构域V的情况下,完整的和缺口的b2GPI结构域V在0.4uM时均能轻微抑制细胞增殖。综上所述,b2GPI的切口结构域V与AS4.5结合,在整个b2GPI中观察到切口形式。
项目成果
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专利数量(0)
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- 影响因子:2.6
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- 通讯作者:Koike T.
Role of β2-glycoprotein I Domain V in Angiogenesis
β2-糖蛋白 I 结构域 V 在血管生成中的作用
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- 发表时间:2013
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- 发表时间:2013
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- 发表时间:2013
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- 影响因子:0
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- 通讯作者:Yasuda S
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- 期刊:
- 影响因子:0
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- 通讯作者:Atsumi T.
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