デキストラナーゼに見出された新規な現象の分子解析とその応用

葡聚糖酶新现象的分子分析及其应用

• 批准号: 11F01397
• 负责人: 木村 淳夫
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2013
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11F01397/
• 关键词: デキストラナーゼ; 環状化

デキストラナーゼ(DEXと略)の新規な立体構造を使い、(1)～(3)の3現象の調査が目的である。(1)触媒残基 : X線構造解析やケミカル・レスキュー反応を用いて触媒残基の候補であるD189・D340・E412の役割を調べる。(2)連続グライコシンターゼ反応(SGRと略) : 触媒アミノ酸を他の残基に置換しSGRを調べ、反応機構を明らかにする。生成物の構造を調べ、物質素材としての応用を目指す。(3)環状化反応を行うDEX (C-DEXと略) : C-DEXは通常のDEXにない長い挿入アミノ酸配列(LISと略)を有するのでLISの機能を調べる。環状糖生産への関連を調べる。計画は順調に進行しており、本年度の成果を以下に述べる。(1)触媒残基 : 昨年度の結果に引き続き、イソマルトトリオースを用いたソーキング実験をし、X線構造解析を行った。本糖質は転移あるいは縮合反応で高分子化していた。今年度もDEXが「2触媒残基システム」で反応を行う結果を得た。(2)SGR : 1)反応条件の解析 : Dl89変異体が示すSGRが効率良く進行する条件を調べた。特に、塩を加えることで反応が促進された。2)応用研究 : SGRの生成物は、TLCの原点(スポット位置)に止まり移動しないことから、大きな分子量を有することが想像された。反応液にメタノールを加えると混濁物質を観察できた。本混濁物質にデキストラナーゼを作用させるとイソマルトオリゴ糖が生成されることから、デキストランであると結論できた。全糖量測定と還元力分析から、そのDPを算出すると約100となり、人工血液に適することが判明した。本サイズは小型デキストランに分類できる。このデキストラン様多糖の生産は、エンド型加水分解酵素(特にα-グルカンに作用するデキストラナーゼ)で初めて発見された現象である。

New regulations (DEX), (1) ~ (3), (3), (3), (3), (3), (1) ~ (3), (3), (3), (3), (1) ~ (3), (3), (1) ~ (3), (3), (3), (3), (3), (3), (3), (3), (3), (3), (3), (3), (3), (3), (1) ~ (3), (3), (3), (3), (3), (3), (3), (3), (3), (3), (3), (1) ~ (3), (3), (3), (3), (3), (3), (3 (1) Catalyst residue: X-ray analysis method is used to determine whether the catalyst residue is sensitive to D189 ·D340 ·E412. (2) SGR response: the catalyst is sensitive to other residues, and the anti-mechanism is sensitive to SGR. The product is built and the material is used as an indicator. (3) Environmental countermeasure DEX (C-DEX strategy): C-DEX usually requires long-term DEX operation (LIS strategy) and has the ability to improve the performance of LIS equipment. Ambient sugar is used as a raw material for food production. The plan is to conduct a review, and the results of this year are described in the following paragraphs. (1) Catalyst residues: in the results of last year, the results were analyzed by X-ray analysis and X-ray analysis. This sugar is used in the synthesis of high molecular weight. The results of this year's "DEX"2 catalyst residue" counter-campaign were satisfactory. (2) SGR: 1) reverse condition analysis: Dl89 test shows that the rate of SGR is good and the condition is good. Special efforts have been made to promote the development of the economy. 2) usage study: the SGR product, the TLC origin (location), and the molecular weight of the product, the molecular weight, the molecular weight and the molecular weight. The reverse liquid is used to increase the content of the mixture. This compound has an effect on the production of sugar in the presence of high concentration of sugar. The total sugar content was determined by force analysis, DP was used to calculate the total sugar content, and artificial blood was used to determine the temperature. This program is designed to provide information in a small way. The polysaccharides were isolated and hydrolyzed by polysaccharides and hydrolyzed enzymes (special alpha-hydrolytic enzymes).