アデノウイルス由来小分子ＲＮＡ（ＶＡ－ＲＮＡ）の機能解析と新規ベクターの開発

腺病毒来源的小RNA（VA-RNA）的功能分析和新载体的开发

• 批准号: 12J01471
• 负责人: 町谷 充洋
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012-04-01 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12J01471/
• 关键词: Adベクター; VA-RNA; shRNA; miRNA

アデノウイルス（Ad）由来小分子RNAであるVA-RNAは転写後、Dicerに切断されて約21塩基のmicroRNA（mivaRNA）になる。近年、いくつかのウイルスの増殖にmiRNAプロセシング因子が関わることが報告された。例えば、miRNAプロセシング因子のひとつであるDicerに変異を持つマウスにおいて、ヘルペスウイルスの増殖が促進されることが報告されている。一方で、Adの増殖にこのようなmiRNAプロセシング因子の発現が関与しているかは明らかにされていない。そこで本研究では、Adの増殖にこれらの因子が関わるのかを検討するために、Dicerをノックダウン、もしくは強制発現させた細胞におけるAdの増殖について検討した。Dicerをノックダウンした細胞では、ノックダウンしていない細胞と比較して、野生型Adの増殖が約5倍促進された。一方、Dicerの強制発現させた細胞ではAdの増殖が1/3~2/3程度に抑制された。過去にVA-RNAが転写後、Dicerに切断されてmivaRNAになることが報告されていたので、次にDicerノックダウン細胞におけるVA-RNAコピー数を定量した。Dicerをノックダウンしたところ、VA-RNAコピー数が有意に増加するとともに、その切断体であるmivaRNAコピー数が顕著に低下した。即ち、Dicerに切断されることで細胞内のVA-RNAコピー数が減少することが示唆された。以上の結果より、DicerはAd増殖に必須の因子であるVA-RNAを切断することで、Adの増殖を負に制御していること、また、DicerのノックダウンがAdの増殖を促進することが明らかとなった。

The origin of Ad is small molecule RNA. After writing, Dicer cut off about 21% microRNA (mivaRNA) gene. In recent years, there has been a significant increase in the number of miRNA factors in recent years. For example, miRNA

项目成果

shDicer発現カセットを搭載した改良型腫瘍溶解性アデノウイルスの開発

携带shDicer表达盒的改良溶瘤腺病毒的开发

• 发表时间: 2014
• 作者: 若林圭作;町谷充洋
• 通讯作者: 町谷充洋

デノウイルス由来小分子RNAの欠損によるshRNA発現アデノウイルスベクターにおけるRNAi効果の増強

由于删除了源自腺病毒的小RNA，增强了表达shRNA的腺病毒载体中的RNAi效果

• 发表时间: 2012
• 作者: Machitani M;et al.;町谷充洋
• 通讯作者: 町谷充洋

miR-27はCyclin G1の発現抑制を介してアデノウイルスの増殖を阻害する

miR-27通过抑制Cyclin G1表达抑制腺病毒增殖

• 发表时间: 2014
• 作者: 町谷充洋;櫻井文教;若林圭作;立花雅史;水口裕之
• 通讯作者: 水口裕之

ENHANCEMENT OF ADENOVIRUS VECTOR-MEDIATED RNAi EFFECT BY LACKING VA-RNA EXPRESSION

通过缺乏 VA-RNA 表达增强腺病毒载体介导的 RNAi 效应

• 发表时间: 2012
• 作者: Machitani M;et al.
• 通讯作者: et al.

Dicerはアデノウイルス由来小分子RNA（VA-RNA）の切断を介してアデノウイルスの感染を抑制する

Dicer 通过裂解腺病毒衍生的小 RNA (VA-RNA) 抑制腺病毒感染

• 发表时间: 2014
• 作者: 櫻井文教;町谷充洋;若林圭作;立花雅史;水口裕之
• 通讯作者: 水口裕之