長鎖非コードＲＮＡの細胞内局在制御機構

长链非编码RNA的细胞内定位控制机制

• 批准号: 16J09564
• 负责人: 町谷 充洋
• 金额: $ 2.08万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2016
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2016-04-22 至 2019-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16J09564/
• 关键词: 長鎖非コードRNA

近年、miRNA、長鎖非コードRNA (lncRNA)の発見などにより、タンパク質をコードせず能動的な機能を有する非コードRNAの存在が明らかになってきた。種々の非コードRNAは特定の場所に局在化し、機能しているが、その局在化機構に関しては、これまでにほとんど明らかにされていない。そこで本研究では、lncRNAの局在化機構、ひいてはその機能解明を試みた。昨年度までに、FISH法によるHOTAIRの検出に成功した。しかしながら、ヒトHOTAIRに対するプローブで、マウス細胞株でもシグナルが検出された。この原因としては、今回用いたプローブは、種特異性が低く、保存性の高いターゲット（ここではマウスHOTAIR）を検出してしまったと考えられる。今後は、保存性の低い種の細胞を用いた検討を行うなどの改善を試みたい。また、他のlncRNAの検出を試みた。核内で強く発現し、核内構造体形成に機能するlncRNAであるNEAT1の検出を試みたところ、核内でドット状のシグナルが見られた。現在、NEAT1配列における核局在化エレメントの同定を試みている。一方で、種々のlncRNAは、mRNAと同様に転写後、スプライシングされ、キャップ構造が付加され、ポリA尾部が付加される。これらのRNA転写後修飾・制御はRNAの運命決定に大きく関わることから、lncRNAにおけるその影響を検討した。RNA転写後修飾・制御に関わるいくつかの因子をノックダウンした細胞の各種lncRNAの発現を解析した。その結果、ARS2のノックダウンで上述したNEAT1の2つのisoformの片方のみ発現上昇が見られた。さらに解析を進めたところ、ARS2はNEAT1のalternative 3’-end processing、及び、安定性を制御することにより、核内構造体であるパラスペックルの形成に関わることが明らかとなった。

In recent years, the miRNA, long locks the コ ー ド RNA (lncRNA) の 発 see な ど に よ り, タ ン パ ク qualitative を コ ー ド せ ず motile な function を have す る non コ ー ド RNA の is が Ming ら か に な っ て き た. Kind of 々 の non コ ー ド RNA は specific の place に bureau in し and functional し て い る が, そ の bureau in the institutions に masato し て は, こ れ ま で に ほ と ん ど Ming ら か に さ れ て い な い. Youdaoplaceholder0 そ で で this study で で, lncRNA <s:1> localization mechanism, ひ て て そ そ そ を を function explanation を experiment みた. Last year, までに and the FISH method によるHOTAIR 検 検 achieved に success た. し か し な が ら, ヒ ト HOTAIR に す seaborne る プ ロ ー ブ で, マ ウ ス cell lines で も シ グ ナ ル が 検 out さ れ た. こ の reason と し て は, this reuse い た プ ロ ー ブ は, specificity が low く, save の high い タ ー ゲ ッ ト (こ こ で は マ ウ ス HOTAIR) を 検 out し て し ま っ た と exam え ら れ る. In the future, <s:1> and <s:1> low-preservation <s:1> species <e:1> cells を will be treated with た検 た検 to seek を and うな <s:1> to improve を and みた みた. Youdaoplaceholder0 he <s:1> lncRNA 検 検 went to を みた. Strong core で く 発 し, construct form に function inside nuclear す る lncRNA で あ る NEAT1 の 検 try out を み た と こ ろ, nuclear で ド ッ ト shape の シ グ ナ ル が see ら れ た. Now, NEAT1 is equipped with the における nuclear authority to conduct エレメ, ト, <s:1> and を tests みて, る, る. Side で, kind of 々 の lncRNA は, mRNA と with others に planning, after writing ス プ ラ イ シ ン グ さ れ, キ ャ ッ プ tectonic が plus さ れ, ポ リ A tail が plus さ れ る. こ れ ら の RNA modification after planning to write, suppression は RNA の destiny decided に big き く masato わ る こ と か ら, lncRNA に お け る そ の influence を beg し 検 た. RNA modification after planning to write, suppression に masato わ る い く つ か の factor を ノ ッ ク ダ ウ ン し た cells の various lncRNA の 発 now を parsing し た. そ の results, ARS2 の ノ ッ ク ダ ウ ン で above し た NEAT1 の 2 つ の isoform の piece side の み 発 rise now が see ら れ た. さ ら に parsing を into め た と こ ろ, ARS2 は NEAT1 の the alternative 3 'end processing, and び, stability を suppression す る こ と に よ り, nuclear constructs で あ る パ ラ ス ペ ッ ク ル の form に masato わ る こ と が Ming ら か と な っ た.

项目成果

RNA輸送因子PHAXはヒストンH2AXの発現制御を介してDNA損傷応答に関与する

RNA转运因子PHAX通过调节组蛋白H2AX的表达参与DNA损伤反应

• 发表时间: 2018
• 作者: 町谷充洋;大野睦人
• 通讯作者: 大野睦人

DNA損傷応答におけるRNA輸送因子PHAXの役割

RNA转运因子PHAX在DNA损伤反应中的作用

• 发表时间: 2018
• 作者: 町谷充洋;大野睦人
• 通讯作者: 大野睦人