神経系・心筋を侵すレトロウイルスの病原性発現機構の解明

トリのグリオーマはトリ白血病ウイルスA亜群(ALV-A)に属する Fowl glioma-inducing virus (FGV)が原因であることが明らかになっている。加えて，国内のグリオーマ罹患鶏に心筋異常が発見され，心筋症の発生にALV 感染が関与することが浮き彫りになってきた。しかし，これらの病原性の分子基盤は明らかになっていない。そこで、申請者はALVの神経および心筋への病原性発現機構を解明するため，1)新たに分離されたALVの病原性解析，2)遺伝子組換え体による病原性解析，3)LTRの機能解析，4)転写因子の同定と比較を行うこととした。これまでに，本年度はIL-1β発現量増加がSp-53株以外の神経病原性ALV株でも観察できるか否かを観察した。鶏卵に神経病原性ALV株5株を接種し，孵化後35日齢でのグリオーマ形成能と脳内のIL-1βのmRNA発現量を解析すると，強いグリオーマ誘発能を示したALV株ほど脳内のIL-1βmRNA発現量が多いことがわかった。これらの成績から，神経病原性ALV株による感染初期のアストロサイトの増殖はアストロサイトでのウイルスの盛んな増殖とそれに続くIL-1β産生が関与していることが示唆された。また，これまでの成績からグリオーマ誘発ALVの発癌機構としてenv蛋白による発癌機序が関与することが推測された。そこで，Sp-53のenv蛋白をヒトアストロサイト株化細胞U251細胞に過剰発現させ，Transformation assayを実施した。その結果，陰性コントロールに比べ，Sp-53のenvを発現させた細胞で有意に多い細胞コロニーが観察されたことから，Sp-53のenv蛋白はアストロサイトの増殖を促進させる作用があることが推察された。この成績はグリオーマ誘発ALVの発癌にenv蛋白が関与しているという考えを支持するものである。

トリのグリオーマはトリ白血病ウイルスA亜群(ALV-A)に属する Fowl glioma-inducing virus (FGV)が原因であることが明らかになっている。加えて，国内のグリオーマ罹患鶏に心筋異常が発見され，心筋症の発生にALV 感染が関与することが浮き彫りになってきた。しかし，これらの病原性の分子基盤は明らかになっていない。そこで、申請者はALVの神経および心筋への病原性発現機構を解明するため，1)新たに分離されたALVの病原性解析，2)遺伝子組換え体による病原性解析，3)LTRの機能解析，4)転写因子の同定と比較を行うこととした。これまでに，本年度はIL-1β発現量増加がSp-53株以外の神経病原性ALV株でも観察できるか否かを観察した。鶏卵に神経病原性ALV株5株を接種し，孵化後35日齢でのグリオーマ形成能と脳内のIL-1βのmRNA発現量を解析すると，強いグリオーマ誘発能を示したALV株ほど脳内のIL-1βmRNA発現量が多いことがわかった。これらの成績から，神経病原性ALV株による感染初期のアストロサイトの増殖はアストロサイトでのウイルスの盛んな増殖とそれに続くIL-1β産生が関与していることが示唆された。また，これまでの成績からグリオーマ誘発ALVの発癌機構としてenv蛋白による発癌機序が関与することが推測された。そこで，Sp-53のenv蛋白をヒトアストロサイト株化細胞U251細胞に過剰発現させ，Transformation assayを実施した。その結果，陰性コントロールに比べ，Sp-53のenvを発現させた細胞で有意に多い細胞コロニーが観察されたことから，Sp-53のenv蛋白はアストロサイトの増殖を促進させる作用があることが推察された。この成績はグリオーマ誘発ALVの発癌にenv蛋白が関与しているという考えを支持するものである。