上皮間葉転換を基軸としたがん転移能獲得機構の解明

基于上皮间质转化阐明癌症转移获得机制

• 批准号: 12J08541
• 负责人: 村松 智輝
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012 至 2013
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12J08541/
• 关键词: がん転移; ゲノム一次構造変化; 遺伝子発現解析; システム生物学的手法; がん転移関連遺伝子; 上皮間葉転換; in vivo EMT imaging; in vivo selection; 転移関連遺伝子; システム生物学

現在、がんは本邦において2人に1人が罹患し、3人に1人が死因となる疾患であり、その本態解明は急務である。特に、がんの悪性化の要因の一つであるがん転移は、複雑かつ多段階のステップによって成立する事象であり、これまでにも様々な分子機序が報告されてきた。しかし、従来のがん転移に関する研究では、有用なin vitro/in vivo解析モデル系が十分でなく、具体的な解析法には制約があり、転移に関与する分子やシグナル経路の同定は困難であった。本研究は、上皮間葉転換を基軸としたがん転移能獲得機構の解明を目的とし、独自の自然転移マウスモデルを確立して解析を行ってきた。同モデルを用いて、間葉系形質を持つ口腔扁平上皮がん細胞株(HOC313)を起源とした高転移性亜株(HOC313-LM)を樹立し、ゲノム・エピゲノム・遺伝子発現の網羅的解析にシステム生物学的手法を組み合わせた統合的オミックス解析から新規がん転移関連遺伝子の同定を試みてきた。その結果、親株には検出されない19番染色体の増幅を認め、同領域に座位する遺伝子に着目し、転移関連遺伝子の同定を行った。siRNAのスクリーニング系により、細胞形態に影響を与える遺伝子を抽出し、同遺伝子の解析を行った結果、RhoAの翻訳制御に関わる遺伝子であることが判明し、RhoAの活性化により移動能・浸潤能が亢進したことを見出した(投稿準備中)。また、EMT関連遺伝子のプロモーター活性を蛍光で検出可能なin vivo EMT imagingシステムの確立をも試みつつ、現在までにVIM (vimentin)プロモーター活性依存的に蛍光を発する細胞株の樹立が終了し、miRNAライブラリーを用いたEMT関連miRNAを同定する機能的スクリーニングを施行している。さらに、マウスへの移植実験を施行し、生体内でのEMT変化を解析する予定である。

Now, two people in this country, one person in this country, three people in this country, one person in this country, one person in this country, one person The main causes of special and special characteristics are reported in the following paragraphs: It is very difficult to determine the molecular structure of the system in vitro/in vivo analysis, and it is very difficult to determine the molecular structure of the system in detail. In this study, the basic axis of epithelial cell transformation was analyzed and the mechanism of cell transformation was established. The study of the origin and origin of the highly migratory cell line (HOC313-LM) was carried out in the same cell line, mesenchymal system, and the analysis of the network of gene development. The results showed that there was no significant difference between the 19 chromosomes in the parent plant and the 19 chromosomes in the same locus. siRNA identification system, cell morphology, gene extraction, gene analysis results, RhoA control system, gene identification, RhoA activation, mobility, infiltration, and enhancement (in preparation). In addition, EMT-related miRNA activation is detected in vivo EMT imaging system. In vivo EMT imaging system, VIM (vimentin) activation is detected in vivo EMT-related miRNA activation. The analysis of EMT transformation in vivo is determined by the implementation of transplantation.

项目成果

Chromosome 19 amplicon in oral cancer cell line have the potential to promote metastasis via Rho signaling pathway.

口腔癌细胞系中的 19 号染色体扩增子具有通过 Rho 信号通路促进转移的潜力。

• 作者: 村松智輝;稲澤譲治 他
• 通讯作者: 稲澤譲治 他

Exploring the role of up-regulated genes in highly metastatic oral cancer subline using spontaneous metastatic mouse model.

使用自发转移小鼠模型探索上调基因在高度转移性口腔癌亚系中的作用。

• 发表时间: 2013
• 作者: Tomoki Muramatsu;Ken-ich Kozaki;Seiya Imoto;Rui Yamaguchi;Hitoshi Tsuda;Tatsuyuki Kaw ano;Satoru Miyano;Johji Inazawa
• 通讯作者: Johji Inazawa

miR-655 Is an EMT-suppressive microRNA targeting ZEB1 and TGFBR2.

miR-655是靶向ZEB1和TGFBR2的EMT抑制microRNA。

• DOI: 10.1371/journal.pone.0062757
• 发表时间: 2013
• 期刊: PloS one
• 影响因子: 3.7
• 作者: Harazono Y;Muramatsu T;Endo H;Uzawa N;Kawano T;Harada K;Inazawa J;Kozaki K
• 通讯作者: Kozaki K

Exploring metastasis-related genes in spontaneous metastatic mouse model using human oral cancer cell line

使用人口腔癌细胞系探索自发转移小鼠模型中的转移相关基因

• 发表时间: 2013
• 作者: 木村文信;山本晃生;村松智輝
• 通讯作者: 村松智輝

Analysis of molecular mechanisms of spontaneous metastasis in mouse model using human oral cancer cell line

人口腔癌细胞系小鼠模型自发转移的分子机制分析

• 发表时间: 2012
• 作者: 木村文信;山本晃生;村松智輝;F. Kimura and A. Yamamoto;村松智輝
• 通讯作者: 村松智輝