ペプチド-高分子複合体による人工基底膜の創製

使用肽-聚合物复合物创建人工基底膜

• 批准号: 12J08608
• 负责人: 山田 雄二
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Tokyo University of Pharmacy and Life Science
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012 至 2013
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12J08608/
• 关键词: ラミニン; ペプチド; 基底膜; アガロース; ヒアルロン酸; シンデカン; インテグリン; 再生医療

平成25年度には、以下に示すようにラミニン由来の細胞接着ペプチドをピアルロン酸に固定化したペプチド-高分子複合体と細胞接着配列を自己会合ペプチドゲルに導入した新規ペプチドマトリックスに関して研究を実施した。①平成24年度、細胞表面のインテグリンに結合するA99ペプチドとシンデカンに結合するAG73ペプチドを9:1で混合しヒアルロン酸マトリックスに修飾した場合に、それぞれのペプチドを単独で用いるよりも優れた生物活性を示すことを明らかにした。また、A99/AG73を修飾したヒアルロン酸ゲル内で細胞を三次元培養した結果、HDFの伸展や、PC12細胞の神経突起伸長が観察された。本研究により、ペプチド-ヒアルロン酸マトリックスは再生医療を目的とした人工基底膜の開発に有用であることが示された。本年度はヒアルロン酸ゲル内で三次元培養されたHDFのコラーゲン発現量がペプチドにより促進されることをPCR解析により明らかにし、これまでのデータとまとめてBiomaterials誌に投稿した。②米国NCI/NIHのJoel Schneider博士の研究するペプチドは自己会合により生理的条件下でヒドロゲル(超分子ゲル)を形成することが特徴で、その機械的強度や生体適合性などから生体材料としての応用が期待されている。本年度はこの自己会合ペプチドを細胞培養マトリックスとして応用するため、HDF(ヒト皮膚由来線維芽細胞)を用いて細胞接着活性の解析を行った。グルタミン酸とバリンの繰り返しを基本とする負電荷の自己会合ペプチドに対して細胞は接着しないが、このペプチドのN末端にインテグリン受容体に特異的に結合するRGD配列を導入すると、インテグリンを介した細胞伸展を伴う細胞接着を促進することが明らかとなった。このように受容体特異的な細胞接着性を有するペプチドゲルは人工基底膜創製の材料として、再生医療への応用が期待される。

Pp.47-53 25 year に は, the following に す よ う に ラ ミ ニ ン origin の cells then ペ プ チ ド を ピ ア ル ロ に ン acid immobilized し た ペ プ チ ド - polymer complex と cells then go を meet their ペ プ チ ド ゲ ル に import し た new rules ペ プ チ ド マ ト リ ッ ク ス に masato し て research を be applied し た. 24 year 1) pp.47-53, cell surface の イ ン テ グ リ ン に combining す る A99 ペ プ チ ド と シ ン デ カ ン に combining す る AG73 ペ プ チ ド を 9:1 で mixed し ヒ ア ル ロ ン acid マ ト リ ッ ク ス に modified し た に, そ れ ぞ れ の ペ プ チ ド を 単 で alone with い る よ り も optimal れ た bioactive を shown す こ と を Ming ら か に し た. ま た, A99 / AG73 を modified し た ヒ ア ル ロ ン acid ゲ ル を で cells within the three dimensional culture し た results, HDF の や, PC12 cells extend の god 経 protuberant elongation が 観 examine さ れ た. This study に よ り, ペ プ チ ド - ヒ ア ル ロ ン acid マ ト リ ッ ク ス は regenerative medical purpose を と し た artificial basement membrane の open 発 に useful で あ る こ と が shown さ れ た. This year's は ヒ ア ル ロ ン acid ゲ ル で three yuan in cultivating さ れ た HDF の コ ラ ー ゲ ン 発 now quantity が ペ プ チ ド に よ り promote さ れ る こ と を PCR analytic に よ り Ming ら か に し, こ れ ま で の デ ー タ と ま と め て Biomaterials will contribute に し た. (2) about the NCI/NIH の Joel Dr. Schneider の research す る ペ プ チ ド は meet their に よ り physiological conditions で ヒ ド ロ ゲ ル (supramolecular ゲ ル) を form す る こ と が, 徴 で, そ の mechanical strength や living body fit な ど か ら raw material と し て の 応 with が expect さ れ て い る. This year's は こ の meet their ペ プ チ ド を cell culture マ ト リ ッ ク ス と し て 応 with す る た め, HDF (ヒ ト skin origin line d bud cells) を with い then active line analytical を の っ て cells た. グ ル タ ミ ン acid と バ リ ン の Qiao り return し を basic と す る negative の meet their ペ プ チ ド に し seaborne は て cells then し な い が, こ の ペ プ チ ド の N terminal に イ ン テ グ リ ン に by let body に specific combination す る RGD with column を import す る と, イ ン テ グ リ ン を interface し た cells extend を with う then を promote す る こ と が Ming ら か Youdaoplaceholder0. こ の よ う に by specific な let body cells then sex を す る ペ プ チ ド ゲ ル は artificial basement membrane created の material と し て, regeneration medical へ の 応 with が expect さ れ る.

项目成果

硬さの異なるAG73/アガロースゲルの生物活性

不同硬度AG73/琼脂糖凝胶的生物活性

• 发表时间: 2012
• 作者: Inoue T;Kohro T;Tanaka T;Kanki Y;Li G;Poh HM;Mimura I;Kobayashi M;Taguchi A;Maejima T;Suehiro JI;Sugiyama A;Kaneki K;Aruga H;Dong S;Stevens JF;Yamamoto S;Tsutsumi S;Fujita T;Ruan X;Aburatani H;Nangaku M;Ruan Y;Kodama T;Wada Y.;山田 雄二
• 通讯作者: 山田 雄二

Laminin-111-derived peptide-hyaluronate hydrogels as a synthetic basement membrane.

层粘连蛋白 111 衍生的肽透明质酸水凝胶作为合成基底膜。

• DOI: 10.1016/j.biomaterials.2013.05.044
• 发表时间: 2013
• 期刊: Biomaterials
• 影响因子: 14
• 作者: 南 晶洋;下野 洋平;Yuji Yamada
• 通讯作者: Yuji Yamada

三次元培養基質としてのペプチド-ヒアルロン酸ゲル

肽-透明质酸凝胶作为三维培养基质

• 发表时间: 2012
• 作者: 伊藤 創祐;沙川貴大;伊藤創祐;伊藤創祐;伊藤創祐;伊藤創祐;Sosuke Ito;伊藤創祐;伊藤創祐;Sosuke Ito;Yuji Yamada;Yuji Yamada;Yuji Yamada;山田 雄二
• 通讯作者: 山田 雄二

Three-dimensional cell culture system using peptide-hyaluronate hydrogels

使用肽-透明质酸水凝胶的三维细胞培养系统

• 发表时间: 2012
• 作者: Maejima T;Inoue T;Kanki Y;Kohro T;Li G;Ohta Y;Kimura H;Kobayashi M;Taguchi A;Tsutsumi S;Iwanari H;Yamamoto S;Aruga H;Dong S;Stevens JF;Poh HM;Yamamoto K;Kawamura T;Mimura I,;Yuji Yamada
• 通讯作者: Yuji Yamada

Laminin Peptide-hyaluronate Matrices for Tissue Engineering

用于组织工程的层粘连蛋白肽-透明质酸基质

• 发表时间: 2013
• 作者: 伊藤 創祐;沙川貴大;伊藤創祐;伊藤創祐;伊藤創祐;伊藤創祐;Sosuke Ito;伊藤創祐;伊藤創祐;Sosuke Ito;Yuji Yamada;Yuji Yamada;Yuji Yamada
• 通讯作者: Yuji Yamada