Analysis of low temperature tolerance of membrane transporters and development of pan-transporter inhibitors

膜转运蛋白的低温耐受性分析及泛转运蛋白抑制剂的开发

• 批准号: 23659081
• 负责人: TAKANO Mikihisa
• 金额: $ 2.33万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2013
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-23659081/
• 关键词: 薬物動態; 生体膜輸送; トランスポーター; 低温忍容性; 汎トランスポーター阻害剤; 薬学; 膜小胞; 輸送阻害剤; 培養細胞; GLUT; 生体膜輸送研究; 赤血球膜小胞; 腎刷子縁膜小胞; ENT; MCT

Low temperature tolerance of membrane transporters, a characteristic showing transport activity even at ice-cold temperature, was examined in human erythrocytes and cultured cancer cells. A facilitative glucose transporter GLUT1 and a facilitative nucleoside transporter ENT1 showed marked low temperature tolerance in erythrocyte membrane vesicles. A secondary active monocarboxylate transporter MCT1 showed low temperature tolerance in erythrocytes. In addition, GLUT1 in culture cells such as A549 and HepG2 also showed low temperature tolerance.In order to evaluate the function of these transporters properly, I attempted to develop novel pan-transporter inhibitors (stop and washing solutions for transport study). Among various reagents tested, solutions containing urea plus formaldehyde and 2-mercaptoethanol plus glutaraldehyde were found to be effective pan-transporter inhibitors in both membrane vesicle and culture cell studies.

在人红细胞和培养的癌细胞中检测了膜转运蛋白的低温耐受性，这是一种即使在冰冷温度下也显示转运活性的特性。促进性葡萄糖转运蛋白GLUT 1和促进性核苷转运蛋白ENT 1在红细胞膜囊泡中表现出明显的低温耐受性。次级活性单羧酸转运蛋白MCT 1在红细胞中表现出低温耐受性。此外，培养细胞如A549和HepG 2中的GLUT 1也显示出低温耐受性，为了正确评价这些转运蛋白的功能，我尝试开发新型泛转运蛋白抑制剂（用于转运研究的终止液和洗涤液）。在测试的各种试剂中，发现含有尿素加甲醛和2-巯基乙醇加戊二醛的溶液在膜囊泡和培养细胞研究中是有效的泛转运蛋白抑制剂。

项目成果

Expression and function of PEPT2 during transdifferentiation of alveolar epithelial cells

PEPT2在肺泡上皮细胞转分化过程中的表达及功能

• DOI: 10.1016/j.lfs.2013.08.008
• 发表时间: 2013
• 期刊: Life Sciences
• 影响因子: 6.1
• 作者: Takano;M.;Horiuchi;T.;Sasaki;Y.;Kato Y.;Nagai;J. and Yumoto;R.
• 通讯作者: R.

Effect of D-glucose on insulin uptake in human alveolar epithelial cell line A549.

D-葡萄糖对人肺泡上皮细胞系 A549 胰岛素摄取的影响。

• 发表时间: 2012
• 作者: Oda;K.;Yumoto;R.;Nagai;J. and Takano;M.
• 通讯作者: M.

哺乳類トランスポーターの低温忍容性とその普遍性に関する検討

哺乳动物转运蛋白的耐冷性及其普适性研究

• 发表时间: 2011
• 作者: 今岡大明;鈴木聡;永井純也;湯元良子;高野幹久
• 通讯作者: 高野幹久

Gadolinium modulates gentamicin uptake via an endocytosis-independent pathway in HK-2 human renal proximal tubular cell line.

• DOI: 10.1016/j.ejphar.2012.03.030
• 发表时间: 2012-06
• 期刊: European journal of pharmacology
• 影响因子: 5
• 作者: T. Sawada;J. Nagai;Yumi Okada;R. Yumoto;M. Takano

生体膜トランスポーターの低温忍容性とそれを考慮した新たな汎輸送反応停止液の開発

生物膜转运蛋白的低温耐受性以及考虑到这一点的新型泛转运反应终止溶液的开发

• 发表时间: 2014
• 作者: 平林 悠;永井純也;湯元良子;高野幹久
• 通讯作者: 高野幹久