Cell surface Engineering by Exogenous addition of GPI Anchored TIMP Functional Domains

通过外源添加 GPI 锚定的 TIMP 功能域进行细胞表面工程

• 批准号: 5413116
• 负责人: Professor Dr. Peter Jon Nelson
• 金额: --
• 依托单位: Arbeitsgruppe Klinische Biochemie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2002-12-31 至 2012-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5413116?language=en
• 关键词: Cell; surface; Engineering; Exogenous; addition

Unser Forschungsprogramm befasst sich mit der Analyse der Regulierung von Matrixmetalloproteinasen (MMP) -Aktivität in Zusammenhang mit der Biologie von Monozyten/Makrophagen/Dendritischen Zellen (DC). Zunächst charakterisieren wir die Expression der Proteasengene und die der funktionellen Proteine während Aktivierung, Reifung und Migration von Monozyten und DC. Danach werden die funktionellen Domänen der Gewebeinhibitoren von MMPs (TIMP-1, -2, -3) mit GPI-Ankern fusioniert, mit FPLC gereinigt und in Zellen zurückgegeben um definierte Konzentrationen spezifischer Proteine an der Zelloberfläche zu erhalten. Die Wirkung dieser definierten Proteinkonzentrationen wird dann im Zusammenhang mit Chemokin-induzierter Rekrutierung von Monozyten/Makrophagen/Dendritischen Zellen unter physiologischen Flussbedingungen, während transendothelialer Migration, Transbasalmembran-Migration und auf die Induktion von Effektorfunktionen untersucht werden. Diese Reagenzien unterstützen die genaue Analyse der Proteasenkaskade und -aktivitäten, die an der Aktivierung, Entwicklung, Wanderung und Funktion von Monozyten/Makrophagen/Dendritischen Zellen beteiligt sind.

本研究计划首先通过单抗/巨噬细胞/树突状细胞（DC）生物制剂对基质金属蛋白酶（MMP）活性的调节作用进行分析。蛋白质的表达和功能性蛋白质在单核细胞和树突状细胞上的活化、再活化和迁移具有显著的特点。通过GPI-Ankern融合、FPLC生成和Zellen确定特定蛋白质和Zelloberfläche之间的关系，可以确定MMP-1、TIMP-2、TIMP-3的功能域。在生理性流感中，通过对Monozyten/Makrophagen/Dendritischen Zellen的化学诱导剂的研究，通过跨内皮细胞迁移、跨基底膜迁移和诱导效应功能韦尔登，可以确定蛋白质拮抗作用。该试剂用于蛋白质吸附和活化的一般分析，以及单抗/噬菌体/树突状细胞的活化、发育、迁移和功能。