Cell surface Engineering by Exogenous addition of GPI Anchored TIMP Functional Domains

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Unser Forschungsprogramm befasst sich mit der Analyse der Regulierung von Matrixmetalloproteinasen (MMP) -Aktivität in Zusammenhang mit der Biologie von Monozyten/Makrophagen/Dendritischen Zellen (DC). Zunächst charakterisieren wir die Expression der Proteasengene und die der funktionellen Proteine während Aktivierung, Reifung und Migration von Monozyten und DC. Danach werden die funktionellen Domänen der Gewebeinhibitoren von MMPs (TIMP-1, -2, -3) mit GPI-Ankern fusioniert, mit FPLC gereinigt und in Zellen zurückgegeben um definierte Konzentrationen spezifischer Proteine an der Zelloberfläche zu erhalten. Die Wirkung dieser definierten Proteinkonzentrationen wird dann im Zusammenhang mit Chemokin-induzierter Rekrutierung von Monozyten/Makrophagen/Dendritischen Zellen unter physiologischen Flussbedingungen, während transendothelialer Migration, Transbasalmembran-Migration und auf die Induktion von Effektorfunktionen untersucht werden. Diese Reagenzien unterstützen die genaue Analyse der Proteasenkaskade und -aktivitäten, die an der Aktivierung, Entwicklung, Wanderung und Funktion von Monozyten/Makrophagen/Dendritischen Zellen beteiligt sind.