Untersuchungen zur Oligomerisierung und Regulation von Saccharose-Transportproteinen aus Solanum tuberosum

马铃薯蔗糖转运蛋白寡聚化及调控的研究

• 批准号: 5414652
• 负责人: Privatdozentin Dr. Christina Kühn
• 金额: --
• 依托单位: Arbeitsgruppe Pflanzenphysiologie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2002-12-31 至 2006-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5414652?language=en
• 关键词: Untersuchungen; zur; Oligomerisierung; und; Regulation

Ziel des Vorhabens ist es, die Regulation der am Saccharosetransport in Solanum tuberosum beteiligten Membranproteine aufzuklären. Drei verschiedene Saccharosetransporter-ähnliche Proteine mit unterschiedlichen kinetischen Eigenschaften wurden bisher in Kartoffelpflanzen beschrieben: während StSUT1 einen hochaffinen Saccharosetransporter und StSUT4 einen Transporter mit deutlich geringerer Affinität zum Substrat Saccharose darstellt, konnte für StSUT2 bislang keine Aktivität nachgewiesen werden. SUT2 weist dagegen strukturelle Besonderheiten auf und besitzt Ähnlichkeiten zu hefe-eigenen Zuckersensorproteinen. SUT2 besitzt ausgedehnte cytoplasmatische Domänen mit jeweils hochkonservierten Bereichen, die möglicherweise Bindungsstellen für regulatorische Interaktionspartner darstellen. Ein Durchmustern einer Kartoffel cDNA Bank unter Verwendung des GATEWAY Klonierungssystems (Invitrogen) soll bei der Identifizierung von Interaktionspartnern helfen, die möglicherweise die Aktivität oder die Bindung des SUT2 an andere Membranproteine beeinflussen können. Eine Interaktion der drei Saccharosetransportproteine SUT1, SUT2 und SUT4 untereinander ist in der Hefezelle über das Split Ubiquitin System bereits nachgewiesen worden. Die Analyse transgener Pflanzen, in denen gezielt eines der drei Proteine vermindert exprimiert wird, soll zum besseren Verständnis derartiger Interaktionen untereinander in der Pflanze beitragen. Anhand von Techniken wie native Gelelektrophorese bzw. Gelfiltration sollen höhere molekulare Komplexe identifiziert werden, um eine Form der Regulation über Oligomerisierung aufzuklären. Andere post-translationale Regulationsmechanismen (wie z.B. Regulation über Phosphorylierung/Dephosphorylierung) sollen ebenfalls unter Verwendung der zur Verfügung stehenden spezifischen Antikörper untersucht werden.

Ziel des Vorhabens ist es，die Regulation der am Amobosetransport in Solanum tuberosum beteiligten Membranproteine aufzuklären.在Kartoffelpflanzen中，三种不同的蛋白质转运体--具有不同的动力学特征的蛋白质可能会更好地发挥作用：StSUT 1是一种高亲和力的蛋白质转运体，而StSUT 4是一种具有双亲和力的转运体，可以在底物中发挥作用，但StSUT 2没有韦尔登。SUT 2是一种结构化的蛋白质，可以使其与Zuckersensorproteinen结合。SUT 2被置于细胞质Domänen mit jeweils hochkonservierten Bereichen，die möglicherweise Bindungsstellen für regulatorische Interaktionspartner darstellen。通过GATEWAY Klonierungssystems（Invitrogen）建立一个Kartobacter cDNA Bank，以帮助Interaktionspartnern的鉴定，提高SUT 2的活性或结合力，并使膜蛋白产生影响。在Hefezelle中，三种转运蛋白SUT 1、SUT 2和SUT 4之间的相互作用需要进一步研究。Pflanzen的转基因分析，在三种蛋白质寄生虫中进行，解决了Pflanze beitragen中相互作用的最佳方法。Anhand von Techniken wie native Gelelektrophorese bzw.凝胶过滤sollen höhere molekulare Komplexe identifiziert韦尔登，um eine Form der Regulation über Oligomerisierung aufzuklären.以及事后监管机制（如z.B. Regulation über Phosphorylierung/Dephosphorylierung）sollen ebenfalls unter Verwendung der zur Verfügung stehenden spezifischen Antikörper untersucht韦尔登.