Strukturanalyse der stark gekrümmten Caveolenmembran. Einfluß des Caveolins und der Caveolinlipide auf die Strukturbildung

强烈弯曲的小凹膜的结构分析。

• 批准号: 5418131
• 负责人: Privatdozent Dr. Martin Westermann
• 金额: --
• 依托单位: Elektronenmikroskopisches Zentrum
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2003-12-31 至 2007-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5418131?language=en
• 关键词: Strukturanalyse; der; stark; gekr; mmten

Ziel des Projektes ist es, sowohl den Einfluß der Lipidkomponente als auch den der Proteinkomponente auf die Strukturbildung der Caveolenmembran besser zu verstehen. Neben zellbiologischen Methoden stützt sich die Analyse hauptsächlich auf die Elektronenmikroskopie, speziell die Gefrierbruchanalyse und ihre Weiterentwicklung, die Immunmarkierung am GefrierbruchReplika. Diese Methode soll genutzt werden, um die Verteilung caveolenspezifischer Lipide (Ganglioside, Sphingolipide, Ceramid) an Membranen gefriergebrochener Zellkulturzellen unter Verwendung glykolipidspezifischer Antikörper zu untersuchen. Mit dem Ziel die Membranstruktur der Caveolen und speziell die der intakten Caveolin-Hülle ultrastrukturell zu untersuchen, sollen aus Zellkulturzellen Caveolen ohne Einsatz von Detergentien schonend durch Immunpräzipitation isoliert werden. Das Protein Caveolin soll isoliert, in seiner Ultrastruktur charakterisiert und in Modellmembranvesikel mit caveolenähnlicher Lipidzusammensetzung eingebaut werden. Zusätzlich sind im Projekt Versuche zur stereoskopischen Analyse der GefrierbruchImmunmarkierung und zur Erweiterung der Methode auf nicht membrangebundene, cytoplasmatisch lokalisierte Proteine geplant.

因此，本项目中，蛋白质组分对脂质组分的影响也会更好地研究细胞膜的结构。Neben zellbiologischen Methoden stützt sich die analysis hauptsächlich auf die Elektronenmikroskopie，speziell die Gefrierbruchanalysis und ihre Weiterentwicklung，die Immunmarkierung am Gefrierbruchdeka.该方法适用于韦尔登（神经节苷脂、鞘脂、神经酰胺）和Zellkulturzellen膜的渗透，用于渗透糖脂。通过对Caveolen膜结构的研究和对Caveolin-Hülle细胞超微结构的研究，我们发现Caveolen细胞培养的结果是通过免疫沉淀分离韦尔登获得的。Das Protein Caveolin soll isoliert，in seiner Ultrastruktur charakterisiert and in Modellmembranvesikel mit caveolenähnlicher Lipidzusammensetzung eingebaut韦尔登。本研究旨在对GefrierbruchImmunmarkierung的立体定位分析和不依赖于细胞质局部蛋白质生成的方法进行验证。